Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-Fosfo-RPA2 (T21) per WB, ELISA - P15927

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RPA2

• RPA2 (nota anche come REPA2, RPA32, RP-A p32, RP-A p34) è la subunità da 32 kDa del complesso eterotrimero della proteina di replicazione A (RPA), una principale proteina legante il DNA a filamento singolo.
• Il complesso RPA si lega e stabilizza gli intermedi di ssDNA formati durante la replicazione del DNA o in seguito a stress del DNA, prevenendo il loro riannullamento e reclutando proteine coinvolte nel metabolismo del DNA.
• Nella risposta cellulare al danno del DNA, RPA2 è essenziale per reclutare il complesso chinasi ATRIP-ATR e fattori di riparazione come RAD51, RAD52, XPA, XPG e SMARCAL1 sulla cromatina.
• RPA2 contribuisce alla riparazione per escissione di nucleotidi (NER) e alla riparazione per escissione di basi (BER) attraverso l'interazione con UNG, e può svolgere anche un ruolo nella manutenzione dei telomeri.
• RPA stimola l'attività elicasi 5'-3' di BRIP1/FANCJ, facilitando il riavvio della forca di replicazione e la riparazione del DNA. Riferimenti correlati: PMID:17596542
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente nucleare, con arricchimento nei corpi PML.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione (legame isopeptidico, coniugazione Ubl), riflettendo la sua regolazione dinamica.
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme ed è identificata come una fosfoproteina del proteoma di riferimento.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico attorno a T21 di RPA2 umana; ci si aspetta che l'anticorpo riconosca specificamente la forma fosforilata T21. Utilizzare controlli appropriati (es. peptide non fosforilato o lisati trattati con fosfatasi) per confermare la specificità.
• Per l'analisi Western Blot (WB), il peso molecolare previsto di RPA2 è di circa 29 kDa. Includere inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare la fosforilazione.
• L'anticorpo è stato utilizzato in WB ed ELISA. Ottimizzare le diluizioni e le condizioni per il proprio sistema sperimentale specifico.
• La reattività crociata è riportata con campioni umani e di ratto; validare le prestazioni in altre specie se necessario.
• Considerare l'utilizzo di estratti nucleari o di cellule con danno al DNA per potenziare il rilevamento, data la localizzazione nucleare di RPA2 e il suo ruolo nella risposta al danno del DNA.

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