Anticorpo policlonale di coniglio Anti-Fosfo-RPS6KA5-S376 per WB, IHC-P, ELISA - O75582

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RPS6KA5

• RPS6KA5, noto anche come MSK1 o 90 kDa ribosomal protein S6 kinase 5, è una serina/treonina-proteina chinasi con un peso molecolare di circa 90 kDa. Appartiene alla famiglia RSK e svolge ruoli fondamentali nella trasduzione del segnale dalla superficie cellulare al nucleo.
• Media la fosforilazione indotta da mitogeni e stress dei fattori di trascrizione CREB1 e ATF1, regolando di conseguenza la loro attività trascrizionale. Questo processo avviene in risposta a stimoli come UV-C, EGF e anisomicina. Riferimenti correlati: PMID:11909979 PMID:9873047
• È essenziale per il controllo dell'attività trascrizionale di RELA (NF-kB p65) in risposta a TNF e glucocorticoidi, contribuendo alla repressione dell'espressione genica infiammatoria. Nei mioblasti scheletrici, fosforila RELA alla Ser-276 durante lo stress ossidativo. Riferimenti correlati: PMID:12628924 PMID:18511904
• Modula direttamente la struttura della cromatina fosforilando l'istone H3 alla Ser-10 e probabilmente alla Ser-28, nonché l'istone H2A alla Ser-1. La fosforilazione dell'istone H3 promuove l'attivazione trascrizionale dei geni a risposta immediata come c-fos e c-jun. Riferimenti correlati: PMID:12773393 PMID:15010469
• Fosforila e regola molteplici altri substrati, tra cui STAT3 (alla Ser-727), il fattore di trascrizione ETV1/ER81 (alla Ser-191 e Ser-216), la proteina HMGN1 del gruppo ad alta mobilità e l'ubiquitina ligasi TRIM7 (alla Ser-107). Riferimenti correlati: PMID:12763138 PMID:12569367 PMID:25851810
• Si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma, permettendogli di trasdurre i segnali dalle cascate di chinasi citoplasmatiche ai bersagli nucleari.
• È ampiamente espresso in tutti i tessuti, con i livelli più alti nel cuore, cervello e placenta; livelli più bassi nel polmone, rene e fegato.
• Agisce nella regolazione a feedback negativo delle risposte infiammatorie nei macrofagi limitando la produzione di citochine proinfiammatorie attraverso la via TLR4, probabilmente attraverso l'induzione di DUSP1 e IL10.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico corrispondente alla Ser376 di RPS6KA5 umana. Questo progetto produce probabilmente un anticorpo specifico per la forma fosforilata; si consiglia di verificare la specificità trattando i campioni con lambda fosfatasi o utilizzando un competitore non fosfopeptido negli esperimenti di blocco.
• Per le applicazioni di Western blot (WB), includere inibitori di fosfatasi nei buffer di lisì per preservare il segnale di fosforilazione. La dimensione prevista della banda è ~90 kDa; confermare rispetto a marcatori di peso molecolare appropriati.
• Nell'immunohistochimica (IHC-P), le condizioni di recupero dell'antigene e la rilevazione di epitopi fosfo-specifici possono richiedere ottimizzazione. Utilizzare tessuti di controllo positivo noti con elevata espressione di RPS6KA5, come cervello o cuore.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; l'abbinamento con una controparte non fosfo-specifica può consentire la valutazione quantitativa dei livelli di fosforilazione. Convalidare nel sistema di campionamento appropriato.

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