Anticorpo Policlonale Anti-Fosfo-SHP1-Y564 (PTPN6) per WB, ELISA - P29350

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SHP-1 (PTPN6)

• SHP-1 (PTPN6) è una tirosina fosfatasi non recettoriale, nota anche come proteina tirosina fosfatasi delle cellule ematopoietiche (HCP), PTP-1C e SH-PTP1. L'isoforma 1 è espressa nelle cellule ematopoietiche, mentre l'isoforma 2 si trova nei tessuti non ematopoietici.

• SHP-1 regola negativamente la segnalazione defosforilando le tirosin chinasi recettoriali (RTK) tra cui EGFR, PDGFR e FGFR, e agendo sui recettori contenenti il motivo inibitorio basato su tirosina degli immunorecettori (ITIM) come PDCD1 e LILRB1 per inibire l'attivazione delle cellule immunitarie. Riferimenti correlati: PMID:21258366, PMID:9733788, PMID:11907092, PMID:14739280, PMID:37932456

• Modula la segnalazione dei recettori delle citochine (ad esempio, il recettore IL-4) e defosforila bersagli citoplasmatici come STING1, LCK e STAT1, collegando così le vie immunitarie innate e adattative. Riferimenti correlati: PMID:9065461, PMID:34811497, PMID:38532423

• Nel nucleo, SHP-1 defosforila fattori di trascrizione come NFAT5 e regola la gluconeogenesi epatica tramite il reclutamento della RNA polimerasi II mediato da STAT5A al promotore PCK1. Riferimenti correlati: PMID:37595871

• Subcellularemente, SHP-1 si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, in linea con il suo doppio ruolo nella terminazione del segnale e nel controllo trascrizionale.

• La proteina è regolata da fosforilazione (ad esempio, in Y564) e presenta domini SH2 e siti di coniugazione simili all'ubiquitina, evidenziando la sua complessità post-traduzionale.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un fosfopeptide sintetico intorno alla Y564; pertanto, si prevede che l'anticorpo riconosca specificamente la forma fosforilata di SHP-1. Includere controlli sia non trattati che trattati con fosfatasi nel western blotting per confermare la fosfo-specificità.
• Per il WB, utilizzare condizioni denaturanti standard e considerare di aggiungere inibitori di fosfatasi al tampone di lisi per preservare la fosforilazione. Il peso molecolare previsto è ~68 kDa, ma la migrazione effettiva può variare.
• Convalidare la reattività dell'anticorpo nel vostro sistema cellulare o tissutale di interesse, in particolare tra fonti ematopoietiche e non ematopoietiche (differenze nell'espressione delle isoforme).
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per la rilevazione del fosfo-SHP-1; l'abbinamento con un anticorpo SHP-1 totale può consentire la normalizzazione.
• Ottimizzare le diluizioni dell'anticorpo e le condizioni di incubazione poiché i requisiti variano tra i tipi di campione e i progetti sperimentali.

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