Anti-Fosfo-SMAD1-S463/S465+SMAD5-S463/S465+SMAD9-S465/S467 Coniglio mAb per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15797/Q99717/O15198

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SMAD1

• SMAD1 (Mothers against decapentaplegic omologo 1, noto anche come BSP1, JV4-1, MADH1) appartiene alla famiglia dei mediatori intracellulari dei fattori di trascrizione SMAD.
• Al legame del ligando BMP, SMAD1 viene fosforilato a Ser463/465 dai recettori BMP di tipo I attivati, quindi forma un complesso con SMAD4 e transloca nel nucleo. Riferimenti correlati: PMID:9335504 PMID:33667543
• Una volta nel nucleo, il complesso SMAD1/SMAD4 si lega agli Elementi di Legame Smad (SBEs) per regolare la trascrizione dei geni bersaglio coinvolti nello sviluppo embrionale, nella differenziazione cellulare e nell'omeostasi tissutale.
• SMAD1 media la degradazione del repressore CREBBP/EP300 SNIP1 attraverso un complesso OAZ1/PSMB4, che modula ulteriormente l'espressione genica (Per similarità).
• A livello subcellulare, SMAD1 risiede sia nel citoplasma che nel nucleo, con la translocazione nucleare dipendente dalla fosforilazione indotta da BMP.
• L'espressione è ubiquitaria, con i livelli più alti osservati nel cuore e nel muscolo scheletrico.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la fosforilazione (attivazione), l'acetilazione e l'ubiquitinazione; la proteina presenta anche motivi di legame allo zinco.
• Parole chiave da UniProt: struttura-3D, Acetilazione, Splicing alternativo, Legame al DNA, Legame ai metalli, Fosfoproteina, Regolazione della trascrizione, Coniugazione Ubl, Zinco.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo è stato sviluppato contro un peptide fosforilato sintetico che comprende il motivo di fosforilazione conservato (SSVS) in SMAD1, SMAD5 e SMAD9; si consiglia di confermare la specificità confrontando lisati cellulari trattati con BMP rispetto a non trattati nel Western blotting.
• Per il Western blotting, caricare lisati trattati appropriati e includere inibitori delle fosfatasi durante la preparazione; la dimensione della banda attesa è di circa 52 kDa, ma la fosforilazione può causare lievi spostamenti.
• Per IHC-P e IF/ICC, validare l'anticorpo con tessuti/cellule di controllo positivi e negativi dove la segnalazione BMP è nota essere attiva o inattiva; la colorazione nucleare indica complessi SMAD attivati.
• Nell'ELISA, titolare l'anticorpo contro peptidi fosforilati e non fosforilati per verificare la fosfo-specificità.
• La reattività incrociata è riportata per umano, topo e ratto; assicurare l'allineamento della sequenza specifica per la specie attorno ai siti di fosforilazione prima dell'uso con altre specie.

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