Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-Fosfo-Smad2-S250 per WB, ELISA - Q15796

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Smad2

• SMAD2 (noto anche come JV18-1, MADH2, hMAD-2) è una SMAD regolata dal recettore (R-SMAD) e un key trasduttore del segnale intracellulare nelle vie di segnalazione TGF-beta e activin.
• Al legame del ligando, SMAD2 viene fosforilata dalle chinasi del recettore di tipo 1, forma un complesso eteromerico con SMAD4, si transloca nel nucleo e lega l'elemento TRE per regolare la trascrizione dei geni bersaglio.
• SMAD2 regola positivamente l'attività della chinasi PDPK1 promuovendo il suo distacco dalla proteina inibitoria 14-3-3 YWHAQ.
• Può funzionare come soppressore tumorale nel carcinoma del colon-retto. Riferimenti correlati: PMID:8752209
• La proteina si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo.
• Specificità tessutale: Espressa ad alti livelli nel muscolo scheletrico, nelle cellule endoteliali, nel cuore e nella placenta.
• Le modificazioni post-traduzionali includono fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione; la proteina contiene anche domini di legame allo zinco e subisce splicing alternativo.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico corrispondente alla serina 250 della Smad2 umana; pertanto, l'anticorpo è specifico per la forma fosforilata in questo sito. Verificare la specificità utilizzando un trattamento con fosfatasi o mutanti difettivi nella fosforilazione.
• Per il Western blot (WB), considerare l'utilizzo di un anticorpo totale Smad2 come controllo di carico. Ottimizzare le condizioni di blocco e la diluizione dell'anticorpo; il blocco a base di BSA può ridurre il rumore di fondo rispetto al latte quando si eseguono indagini su proteine fosforilate.
• Per l'ELISA, convalidare in lisati cellulari trattati con TGF-beta rispetto a non trattati per confermare il rilevamento dipendente dall'attivazione. Le coppie fosfo-specifiche potrebbero richiedere un'attenta ottimizzazione delle condizioni di cattura e rilevamento.
• La reattività incrociata elencata include umano e mouse; per altre specie, verificare l'omologia di sequenza nel sito di fosforilazione e convalidare sperimentalmente.
• Come anticorpo monoclonale di coniglio, fornisce alta affinità e prestazioni coerenti lotto dopo lotto, supportando lo sviluppo di saggi robusti.

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