Anticorpo Policlonale Anti-Fosfo-Smad2 (Ser467) per WB, IHC-P, ELISA - Q15796

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SMAD2

• SMAD2 (membro 2 della famiglia SMAD), noto anche come JV18-1, MADH2 o hMAD-2, è una SMAD regolata dal recettore (R-SMAD) che funge da trasduttore di segnale intracellulare e modulatore trascrizionale a valle delle chinasi del recettore di tipo TGF-beta e attivina.
• Dopo il legame del ligando, SMAD2 viene fosforilata e forma un complesso con SMAD4. Questo complesso si trasloca nel nucleo, si lega all'elemento TRE nei promotori dei geni target e attiva la trascrizione, regolando così processi cellulari diversi.
• SMAD2 regola positivamente l'attività chinasica di PDPK1 promuovendone la dissociazione dalla proteina inibitoria 14-3-3 YWHAQ, influenzando così le vie di segnalazione a valle.
• Può agire come soppressore tumorale nel carcinoma del colon-retto, come suggerito da studi funzionali. Riferimenti correlati: PMID:8752209
• SMAD2 promuove la trascrizione mediata da TGFB1 di geni di differenziazione odontoblastica nelle cellule della papilla dentale, evidenziando un ruolo nella differenziazione tessuto-specifica.
• La localizzazione subcellulare è principalmente citoplasmatica in assenza di segnale, ma dopo fosforilazione si trasloca nel nucleo. La proteina si sposta tra il citoplasma e il nucleo in modo dipendente dalla fosforilazione.
• SMAD2 è ampiamente espressa, con alti livelli riscontrati nel muscolo scheletrico, nelle cellule endoteliali, nel cuore e nella placenta, in linea con il suo ruolo nella segnalazione cardiovascolare e dello sviluppo.
• La proteina subisce multiple modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione (critica per l'attivazione), acetilazione e ubiquitinazione. È anche una fosfoproteina legante lo zinco con un peso molecolare di circa 52,3 kDa.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato era un peptide sintetico fosforilato intorno a Ser467 di SMAD2 umano. Per garantire il rilevamento della forma fosforilata, considerare l'uso di inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto di SMAD2 è ~52 kDa. Osservare bande di questa dimensione; bande aggiuntive possono rappresentare isoforme o modificazioni post-traduzionali.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene poiché gli anticorpi specifici per la fosforilazione possono essere sensibili ai metodi di fissazione.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere impiegato per il rilevamento fosfo-specifico; l'abbinamento con un anticorpo per SMAD2 totale può consentire la valutazione della stechiometria della fosforilazione.
• Convalidare la specificità dell'anticorpo nella specie e nel sistema campione rilevanti utilizzando controlli positivi e negativi appropriati (ad esempio, lisati trattati con fosfatasi per il WB).

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