Anticorpo policlonale rabbit Anti-Fosfo-Smad3 (S423/S425) per WB, IHC-P, ELISA - P84022

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di SMAD3

• SMAD3 (Mothers against decapentaplegic homolog 3) è una SMAD regolata da recettore (R-SMAD) che funziona come trasduttore di segnale intracellulare per le chinasi del recettore di tipo 1 di TGF-beta e activina.
• Dopo la fosforilazione in S423/S425, SMAD3 forma complessi con SMAD4 per regolare la trascrizione dei geni bersaglio legando l'elemento TRE nei promotori, oppure con SMAD4/JUN/FOS nei siti AP-1/SMAD.
• SMAD3 inibisce la guarigione delle ferite modulando la crescita e la migrazione dei cheratinociti e la chemiotassi dei monociti in modo ormone-sensibile.
• Regola positivamente l'attività chinasi di PDPK1 promuovendo la dissociazione dalla proteina 14-3-3 YWHAQ, regolatore negativo.
• Regola la condrogenesi e l'osteogenesi e inibisce la guarigione precoce delle fratture ossee.
• Localizzazione subcellulare: si sposta tra citoplasma e nucleo; si accumula nel nucleo dopo l'attivazione.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, acetilazione, ADP-ribosilazione e ubiquitinazione; interagisce con proteine ospite-virus.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosfo-specifico; includere sempre inibitori di fosfatasi durante la preparazione del campione per preservare la fosforilazione di S423/S425.
• In Western blot si osserva una banda prevista di circa 48 kDa; confermare la migrazione nel proprio sistema di gel specifico.
• La reattività crociata con mouse e ratto è riportata; convalidare la rilevazione nella specie e nel tessuto di interesse includendo controlli appropriati.
• Per IHC-P, considerare di ottimizzare il recupero dell'antigene e utilizzare un protocollo di rilevamento fosfo-specifico per garantire la specificità del segnale.
• Confermare la fosfo-specificità trattando i lisati con fosfatasi o utilizzando la competizione con peptide non fosforilato.

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