Anticorpo Policlonale Anti-Fosfo-SMO (S611/S615/S616) per WB, ELISA - Q99835

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SMO

• SMO è un recettore accoppiato a proteine G (GPCR) che media la via di segnalazione hedgehog, essenziale per lo sviluppo embrionale e la differenziazione cellulare.
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• In assenza di hedgehog, SMO è mantenuto in stato inattivo dalle proteine patched (PTCH1/PTCH2) che limitano l'accesso al colesterolo. Il legame del ligando hedgehog a patched rimuove questa inibizione, permettendo a SMO di traslocare verso la membrana del ciglio primario, dove il colesterolo si lega e attiva SMO. Questo innesca l'accoppiamento con le proteine G(i), inibendo l'adenilato ciclasi e riducendo i livelli intracellulari di cAMP.
  Riferimenti correlati: PMID:27437577, PMID:28344083, PMID:31168089, PMID:32929279

• I livelli ridotti di cAMP alleviano la soppressione mediata dalla protein chinasi A (PKA), promuovendo il rilascio e la traslocazione nucleare dei fattori di trascrizione GLI (GLI1, GLI2, GLI3), che successivamente attivano l'espressione dei geni target.
  Riferimenti correlati: PMID:31168089

• SMO attivo sopprime ulteriormente l'attività della PKA legando direttamente e sequestrando la sua subunità catalitica (PRKACA) sulla membrana cellulare, prevenendo così la fosforilazione e il processamento proteolitico dei fattori di trascrizione GLI.
  Riferimenti correlati: PMID:36202993, PMID:39138140

• SMO promuove la rimozione di GPR161, un inibitore costitutivo della via, dai cigli primari, facilitando ulteriormente la trasduzione del segnale.

• SMO risiede principalmente sulla membrana plasmatica e sulla membrana del ciglio primario, in coerenza con il suo ruolo nella trasduzione del segnale in questi nodi di segnalazione critici.

• SMO subisce modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione, glicosilazione e lipidazione, che contribuiscono alla sua regolazione e localizzazione sulla membrana.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato prodotto contro un peptide sintetico fosforilato che comprende i residui S611, S615 e S616; è previsto che riconosca specificamente la forma fosforilata di SMO umano. Per confermare, si consiglia di eseguire il trattamento con fosfatasi o di confrontare con un anticorpo anti-SMO non fosforilato nel proprio saggio.
• Le applicazioni consigliate sono Western blotting (WB) e ELISA. Per WB, il peso molecolare previsto è 86 kDa; convalidare l'anticorpo utilizzando linee cellulari o tessuti umani rilevanti noti per esprimere SMO attivo.
• Poiché la fosforilazione di SMO è dinamica e aumenta in seguito all'attivazione della via di hedgehog, la stimolazione con sonic hedgehog (SHH) o altri agonisti può migliorare la sensibilità di rilevazione nei vostri esperimenti.
• La reattività incrociata è riportata per SMO umano; se si utilizzano campioni di altre specie, verificare preventivamente l'omologia di sequenza attorno ai siti di fosforilazione.

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