Anticorpo policlonale coniglio Anti-Fosfo-STAT1 (S727) per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42224

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di STAT1

• STAT1 codifica il trasduttore di segnale e attivatore della trascrizione 1, producendo due isoforme principali (STAT1α/p91 e STAT1β/p84) tramite splicing alternativo; è anche noto come componente p91/p84 del fattore di trascrizione ISGF-3.
• STAT1 è un mediatore chiave della segnalazione delle interferoni (IFN): dopo il legame dell'IFN di tipo I (IFN-α/β), forma il complesso ISGF3 con STAT2 e IRF9 per attivare i geni antivirali; in risposta all'IFN di tipo II (IFN-γ), forma omodimeri nel complesso GAF e si lega agli elementi GAS. Riferimenti correlati: PMID:28753426 PMID:35568036 PMID:26479788 PMID:8156998
• La fosforilazione di STAT1 alla Ser727 aumenta la sua attività trascrizionale ed è fondamentale per ottenere risposte biologiche complete; questa modificazione avviene in risposta all'IFN di tipo II e ad altri stimoli. Riferimenti correlati: PMID:26479788
• STAT1 trasduce anche i segnali da KITLG/SCF e dai recettori dei fattori di crescita dei fibroblasti (FGFR1-4). Riferimenti correlati: PMID:15526160 PMID:19088846
• Dopo l'endocitosi di TLR4 indotta da LPS, STAT1 viene fosforilato alla Treonina-749, portando all'attivazione trascrizionale di ARID5A e IL12B. Riferimenti correlati: PMID:32209697
• STAT1 si sposta tra citoplasma e nucleo; in condizioni basali si localizza principalmente nel citoplasma e trasloca nel nucleo dopo l'attivazione.
• STAT1 subisce estese modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione (Tir, Ser, Thr), acetilazione, ADP-ribosilazione, metilazione e ubiquitinazione, che regolano la sua attività, le interazioni e la stabilità.
• Le mutazioni in STAT1 sono associate a patologie del sistema immunitario e immunodeficienze primarie.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Questo anticorpo è prodotto contro un fosfopeptide sintetico che include la Ser727 della STAT1 umana; assicurarsi che nella preparazione dei campioni siano inclusi inibitori di fosfatasi per preservare lo stato di fosforilazione.
• Per Western blotting, la proteina bersaglio migra intorno a 87 kDa; selezionare una percentuale di gel appropriata (es. 8–10% SDS-PAGE) per una separazione ottimale.
• In immunoistochimica e immunofluorescenza, convalidare i pattern di colorazione in tessuti o linee cellulari di controllo positivo noti e includere controlli trattati con fosfatasi per confermare la specificità per la forma fosforilata.
• L'anticorpo presenta reattività incrociata con STAT1 di topo e ratto, ma verificare la reattività nel sistema sperimentale specifico perché la conservazione dell'epitopo può variare.
• Per ELISA, accoppiare l'anticorpo con un anticorpo di cattura convalidato e utilizzare standard di fosfopeptide sintetici per la quantificazione; ottimizzare attentamente le condizioni di bloccaggio e lavaggio.

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