Anticorpo policlonale di coniglio Anti-Fosfo-STAT5-Y694 per WB, IHC-P, ELISA - P42229/P51692

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della STAT5

• STAT5A e la sua isoforma strettamente correlata STAT5B appartengono alla famiglia dei trasduttori di segnale e attivatori della trascrizione (STAT), e agiscono come proteine a doppia funzione nella trasduzione del segnale e nell'attivazione trascrizionale.
• Dopo fosforilazione su un residuo di tirosina conservato (Y694 in STAT5A, Y699 in STAT5B), STAT5 forma dimeri che si traslocano nel nucleo e si legano agli elementi GAS per regolare la trascrizione.
• STAT5 media le risposte cellulari a una vasta gamma di citochine e fattori di crescita, tra cui KITLG/SCF, ERBB4 e FGFR attivati, svolgendo quindi un ruolo fondamentale nella proliferazione, differenziazione e sopravvivenza cellulare.
• Nella ghiandola mammaria, STAT5 è essenziale per la trascrizione indotta dalla prolattina, promuovendo l'espressione delle proteine del latte durante l'allattamento.
• In stato inattivo, la proteina si localizza prevalentemente nel citoplasma; dopo fosforilazione, subisce la traslocazione nucleare.
• STAT5 contiene un dominio SH2 fondamentale per l'ancoraggio al recettore e la dimerizzazione, ed è soggetto a diverse modifiche post-traduzionali, tra cui fosforilazione, ubiquitinazione e acetilazione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Questo anticorpo è stato prodotto contro un peptide sintetico fosforilato corrispondente alla regione Y694 della STAT5 umana; è previsto che rilevi specificamente STAT5A (e STAT5B) fosforilato in questo sito.
• Per Western Blot, è attesa una banda a circa 90 kDa; validare la rilevazione della STAT5 fosforilata nel lisato cellulare/tissutale includendo controlli positivi e negativi appropriati (ad esempio, campioni stimolati vs non stimolati).
• Per IHC-P, valutare l'uso di metodi di recupero dell'antigene (ad esempio, recupero epitopico indotto dal calore) e validare la specificità della colorazione utilizzando peptidi di blocco o sezioni trattate con fosfatasi.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere usato sia come reagente di cattura che di rilevazione; ottimizzare empiricamente le concentrazioni di rivestimento e gli intervalli di rilevazione.
• Si segnala la reazione crociata riportata con topo e ratto; tuttavia, è necessario confermare in ogni singolo esperimento l'idoneità per il tipo di campione e l'applicazione specifici.

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