Anticorpo policlonale di coniglio Anti-Fosfo-Syk (Y525/526) per WB e ELISA - P43405

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di SYK

• SYK (Spleen tyrosine kinase, chinasi tirosinica della milza) è una chinasi tirosinica non recettoriale che media la trasduzione del segnale a valle di numerosi recettori transmembrana, regolando l'immunità innata e adattativa, l'adesione cellulare, la maturazione degli osteoclasti, l'attivazione piastrinica e lo sviluppo vascolare. Riferimenti correlati: PMID:12387735 PMID:33782605
• Essenziale per la segnalazione del recettore delle cellule B (BCR), SYK è necessaria per la maturazione dei linfociti B nella transizione da cellule pro-B a pre-B. Riferimenti correlati: PMID:12456653
• Dopo l'innesco del BCR, SYK fosforila adattatori chiave come BLNK e effettori come PLCG1, collegando il recettore attivato alla mobilizzazione del calcio e alle vie di segnalazione PKC.
• Nel sistema immunitario innato, SYK viene attivata dai recettori delle lectine di tipo C (ad esempio CLEC7A) dopo stimolazione fungina, innescando la produzione di ROS, l'attivazione dell'inflammasoma e la trascrizione di citochine mediata da NF-κB.
• SYK è necessaria per la fagocitosi neutrofila stimolata da IL-15, evidenziando il suo ruolo nella funzione delle cellule mieloidi. Riferimenti correlati: PMID:15123770
• Subcellulamente, SYK si localizza sulla membrana cellulare, nel citoplasma e nel citosol, e si trasloca dinamicamente verso i recettori attivati.
• È ampiamente espresso nelle cellule ematopoietiche, con un'espressione prominente nei lignaggi delle cellule B (da pro-B a plasmacellule) e nei neutrofili. Riferimenti correlati: PMID:8163536
• Le modifiche post-traduzionali includono l'autofosforilazione ai residui tirosinici 525 e 526 nel ciclo di attivazione, oltre all'ubiquitinazione, che regolano l'attività chinasi e la stabilità della proteina.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Poiché questo anticorpo riconosce specificamente la fosforilazione in Tyr525 e Tyr526, assicurarsi di preparare i lisati cellulari con inibitori delle fosfatasi per preservare lo stato di fosforilazione. Per Western blot, validare il segnale trattando i campioni con lambda fosfatasi o confrontando condizioni stimolate e non stimolate.
• Durante l'esecuzione dell'ELISA, considerare l'uso di un antigene di rivestimento a base di peptide fosforilato e un peptide controllo non fosforilato per confermare la specificità per la fosforilazione.
• Le diluizioni ottimali dell'anticorpo per la WB devono essere determinate empiricamente; le diluizioni iniziali tipiche per anticorpi policlonali variano da 1:500 a 1:2000.
• La reattività crociata con altre specie non è prevista in base alla progettazione dell'immunogeno, ma non è stata verificata sperimentalmente.

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