Anticorpo policlonale di coniglio Anti-Phospho-TBC1D4-T642 per WB, ELISA - O60343

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TBC1D4 (AS160)

• TBC1D4, nota anche come AS160 (substrato di Akt da 160 kDa), è un membro della famiglia dei domini TBC1 e agisce come proteina GTPasi-activante (GAP) per le proteine RAB RAB2A, RAB8A, RAB10 e RAB14.
• L'isoforma 2 di TBC1D4 promuove la traslocazione indotta dall'insulina del trasportatore del glucosio SLC2A4/GLUT4 sulla membrana plasmatica, aumentando così l'assorbimento di glucosio in tessuti responsivi come il muscolo scheletrico e il tessuto adiposo.
• Il gene codifica per diverse isoforme: l'isoforma 1 è altamente espressa nel muscolo scheletrico e nel cuore, mentre l'isoforma 2 è ampiamente espressa, con una presenza marcata nella ghiandola surrenale, nella tiroide, nel polmone, nel rene, nel colon, nel cervello e nel tessuto adiposo.
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente citoplasmatica, in linea con il suo ruolo nel traffico vescicolare e nella trasduzione del segnale dal recettore dell'insulina.
• TBC1D4 è regolata tramite fosforilazione su più siti, tra cui la Thr642, che è mediata da Akt/protein kinase B a valle della segnalazione insulinica ed è fondamentale per la sua attività GAP e per la traslocazione di GLUT4.
• L'espressione è ridotta nelle isole pancreatiche di pazienti con diabete di tipo 2, collegando la disfunzione di TBC1D4 all'alterata omeostasi glucidica; è inoltre up-regolata nei linfociti T di pazienti con dermatite atopica, suggerendo un ruolo più ampio nella modulazione immunitaria.
• La proteina subisce modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione (su residui chiave come la Thr642), acetilazione e metilazione, che regolano finemente la sua attività e le sue interazioni.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato corrispondente alla Thr642, che garantisce la specificità per la forma fosforilata; utilizzare sempre inibitori di fosfatasi durante la preparazione dei campioni per preservare lo stato di fosforilazione.
• Per western blotting, il peso molecolare previsto è 147 kDa; convalidare la specificità della banda utilizzando il blocco con peptide non fosforilato o lisati trattati con fosfatasi.
• Nelle applicazioni ELISA, confermare l'efficienza di rivestimento e il titolo dell'anticorpo utilizzando controlli di peptide fosforilato e non fosforilato.
• È stata riportata reattività crociata con il topo; verificare la reattività nel tuo ceppo o tessuto di topo specifico, poiché i livelli di espressione possono variare.
• Prendi in considerazione l'uso di questo anticorpo per monitorare le vie di segnalazione dell'insulina in modelli di insulino-resistenza o diabete di tipo 2, abbinandolo a anticorpi anti-TBC1D4 totali per la normalizzazione.

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