Anticorpo policlonale coniglio anti-Fosfo-TBK1/NAK-S172 per WB, IHC-P, ELISA - Q9UHD2

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TBK1

• TBK1 è una chinasi proteica serina/treonina codificata dal gene TBK1, nota anche come NAK o T2K.
• Gioca un ruolo essenziale nella regolazione delle risposte infiammatorie agli agenti estranei fosforilando i fattori di regolazione dell'interferone (IRF) IRF3 e IRF7, portando alla loro dimerizzazione e translocazione nucleare per indurre geni antivirali come IFNA e IFNB (PubMed:10581243, PubMed:11839743, PubMed:12692549, PubMed:12702806, PubMed:14703513, PubMed:15367631, PubMed:25636800). Riferimenti correlati: PMID:10581243, PMID:11839743, PMID:12692549, PMID:12702806, PMID:14703513, PMID:15367631, PMID:25636800
• TBK1 può anche funzionare come effettore NF-kappa-B fosforilando NFKBIA, IKBKB o RELA, promuovendo così la translocazione nucleare di NF-kappa-B (PubMed:10783893, PubMed:15489227). Riferimenti correlati: PMID:10783893, PMID:15489227
• Agisce nell'autofagia antibatterica fosforilando OPTN su Ser-177, migliorando il legame con LC3 (PubMed:21617041). Riferimenti correlati: PMID:21617041
• TBK1 regola positivamente mTORC1 fosforilando MTOR, ma limita anche mTORC1 tramite la fosforilazione di RPTOR (PubMed:29150432, PubMed:31530866). Riferimenti correlati: PMID:29150432, PMID:31530866
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente citoplasmatica.
• Espresso ubiquitariamente con espressione più elevata nei testicoli; trovato anche nelle cellule gangliari, nello strato di fibre nervose e nella microvascolarizzazione della retina.
• Associato a malattie tra cui la sclerosi laterale amiotrofica e il glaucoma; la fosforilazione svolge un ruolo critico nella sua attività chinasica e nella segnalazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide fosforilato sintetico che circonda Ser172 di TBK1 umano. Per la validazione della specificità fosfo, considerare il trattamento dei campioni con fosfatasi o la pre-incubazione con peptide competitivo non fosforilato.
• Per il western blot, il peso molecolare previsto è di circa 84 kDa; assicurarsi di un'adeguata separazione e trasferimento e utilizzare un marcatore del peso molecolare.
• IHC-P potrebbe richiedere protocolli di recupero dell'antigene ottimizzati; testare sia i metodi a base di citrato che EDTA e considerare l'utilizzo di condizioni favorevoli per gli antigeni fosforilati.
• Questo anticorpo policlonale di coniglio è validato per ELISA; eseguire un'adeguata titolazione per determinare la concentrazione di lavoro ottimale.
• È stata riportata reattività crociata con mouse e ratto, ma la conservazione della sequenza suggerisce che potrebbe riconoscere anche altre specie; validare nel proprio specifico sistema modello.
• Come per tutti gli anticorpi policlonali, può verificarsi variabilità da lotto a lotto; considerare la validazione di ogni nuovo lotto in un esperimento pilota.

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