Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Fosfo-β-Catenina-S45 per WB, ELISA - P35222

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della β-Catenina

• La β-catenina (catenina beta-1) è un effettore chiave a valle della via di segnalazione canonica Wnt. In assenza di Wnt, forma un complesso di degradazione con AXIN1/2, APC, CSNK1A1 e GSK3B che fosforila i residui Ser/Thr N-terminali, portando all'ubiquitinazione da parte di BTRC e alla degradazione proteasomiale. In presenza di ligandi Wnt, la β-catenina sfugge alla degradazione, si accumula nel nucleo e agisce come coattivatore per i fattori di trascrizione TCF/LEF per attivare i geni target Wnt.
  Riferimenti correlati: PMID:17524503 PMID:18077326 PMID:18086858
• Oltre alla segnalazione Wnt, la β-catenina funge anche da coattivatore trascrizionale per altri fattori, come NR5A2, e promuove la transizione epiteliale-mesenchimale (EMT) guidando i geni target di CTNNB1/TCF.
  Riferimenti correlati: PMID:22187462 PMID:29910125
• Come componente del complesso di adesione E-caderina:catenina, la β-catenina media l'adesione cellula-cellula alle giunzioni aderenti, collegando le caderine al citoscheletro di actina.
• La β-catenina è localizzata in più compartimenti subcellulari, tra cui citoplasma, nucleo, giunzioni aderenti, membrana cellulare, centrosoma, polo del fuso e sinapsi, riflettendo i suoi ruoli diversificati nella segnalazione, adesione e polarità.
• Le modifiche post‑traduzionali ne regolano la stabilità e l'attività: fosforilata nei residui Ser/Thr N-terminali per la degradazione, acetilata, S-nitrosilata e ubiquitinata; è anche soggetta a regolazione mediata da sumoilazione. Parole chiave da UniProt includono fosfoproteina, glicoproteina e coniugazione Ubl.
• L'analisi dell'espressione tissutale mostra la β‑catenina in tipi cellulari del follicolo pilifero (matrice basale e periferica, guaina radicolare interna/esterna), colon, neuroni corticali e tessuti di cancro al seno.
  Riferimenti correlati: PMID:29367600
• Il gene CTNNB1 è associato a varie malattie, tra cui cancro (da riarrangiamenti o mutazioni stabilizzanti), disabilità intellettiva e altri disturbi dello sviluppo.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato generato contro un fosfopeptide sintetico intorno a Ser45 della β‑catenina umana; si prevede che riconosca specificamente la β‑catenina fosforilata in Ser45, ma non la proteina non modificata. Per il rilevamento endogeno, includere inibitori delle fosfatasi durante la preparazione del campione.
• In base ai dati del fornitore, l'anticorpo è adatto per applicazioni di Western blot (WB) ed ELISA. Per il WB, convalidare la banda prevista intorno a 85‑kDa in lisati di controllo positivo (ad es., cellule stimolate con Wnt o inibite con GSK3).
• L'anticorpo mostra reattività incrociata con la β‑catenina di topo e ratto, rendendolo utile tra i comuni organismi modello. Confermare sempre la specificità nel proprio sistema utilizzando campioni trattati con fosfatasi o peptidi bloccanti specifici.
• Poiché lo stato di fosforilazione della β‑catenina cambia rapidamente con il trattamento cellulare, la tempistica sperimentale e la manipolazione delle cellule sono critiche; considerare l'uso di un protocollo di stabilizzazione della β‑catenina se anche i livelli totali necessitano di confronto.
• Questo prodotto viene spedito su ghiaccio per preservarne l'attività; conservare le aliquote alle temperature consigliate ed evitare cicli di congelamento-scongelamento.
• Per l'ELISA, ottimizzare le concentrazioni di rivestimento e le condizioni di rilevamento utilizzando controlli standard con fosfo‑peptide rispetto a non‑fosfo‑peptide per garantire la specificità del sito fosforilato.

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