Anticorpo policlonale coniglio anti-Fosfo-VASP-S157 per WB, IHC-P, IP, ELISA - P50552

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della VASP

• VASP (proteina fosforilata stimolata dai vasodilatatori) è un membro della famiglia di proteine associate all'actina Ena/VASP, svolgendo un ruolo fondamentale nel rimodellamento del citoscheletro.
• Promuove l'allungamento dei filamenti di actina proteggendo le estremità a barba dei filamenti in crescita dalle proteine di capping e aumentando i tassi di polimerizzazione tramite il trasferimento di profilina-actina.
• VASP è essenziale per i processi che richiedono polarità e motilità cellulare, inclusa la guida degli assoni, la dinamica dei lamellipodi e filopodi e la migrazione cellulare.
• Nelle piastrine, VASP regola criticamente la dinamica dell'actina necessaria per l'attivazione e l'aggregazione piastrinica, un processo di alta rilevanza fisiologica.
• A livello subcellulare, VASP si localizza nel citoplasma, nelle aderenze focali, nelle giunzioni strette e alle punte dei lamellipodi e filopodi, coerentemente con le sue funzioni citoscheletriche.
• VASP è una fosfoproteina; la fosforilazione a residui specifici, inclusi Ser157, modula la sua attività e il targeting subcellulare.
• È altamente espressa nelle piastrine, coerentemente con il suo ruolo nella biologia piastrinica.
• Strutturalmente, VASP presenta un dominio EVH1, una regione ricca di prolina e un dominio EVH2; la sua regione a elica a spira media la tetramerizzazione e contiene un motivo di legame SH3.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Dato che questo anticorpo mira a un sito di fosforilazione, includere sempre inibitori delle fosfatasi nei buffer di lisi per WB per preservare il segnale fosfo. Validare la specificità utilizzando lisati di controllo trattati con fosfatasi o peptidi di blocco.
• Per WB, considerare una gamma di diluizione iniziale di 1:500–1:2000 e ottimizzare in base al tipo di campione. I lisati piastrinici fungono da eccellenti controlli positivi grazie all'alta espressione di VASP.
• Per IHC-P, il recupero dell'antigene utilizzando tampone citrato (pH 6,0) è spesso utile. Includere controlli appropriati per confermare la colorazione fosfo-specifica.
• Quando si esegue l'IP, utilizzare lisati freschissimi e confermare l'efficienza dell'immunoprecipitazione sondando i blot con un anticorpo VASP totale.
• La reattività crociata è riportata per umano, topo e ratto; verificare le prestazioni nella specie target e nel modello tissutale.

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