Anticorpo policlonale coniglio anti-Fosfo-Recettore VEGF 2-Y1175 per WB - P35968

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del Recettore VEGF 2

• Il Recettore VEGF 2 (VEGFR-2), noto anche come KDR, FLK-1 o CD309, è un recettore tirosin chinasi che funge da principale recettore di segnalazione per VEGFA, VEGFC e VEGFD. È un membro della superfamiglia delle immunoglobuline e contiene più domini extracellulari simili alle immunoglobuline.
• Il VEGFR-2 svolge un ruolo critico nell'angiogenesi e nello sviluppo vascolare, promuovendo la proliferazione, la sopravvivenza, la migrazione e la differenziazione delle cellule endoteliali. È essenziale per l'ematopoiesi embrionale e la permeabilità vascolare.
• Al legame del ligando, il VEGFR-2 attiva cascate di segnalazione a valle, incluse le vie MAPK/ERK e AKT1, attraverso la fosforilazione di residui tirosina chiave come Y1175. La fosforilazione a Y1175 porta all'attivazione di PLCG1 e alla successiva produzione di secondi messaggeri come DAG e IP3.
• Le isoforme prive del dominio transmembrana (isoforma 2 e 3) possono funzionare come recettori decoy, regolando negativamente la linfangiogenesi sequestrando VEGFA e VEGFC e impedendo il loro legame con FLT4. Il VEGFR-2 modula anche la segnalazione formando eterodimeri con FLT1 e FLT4.
• A livello subcellulare, il VEGFR-2 si trova sulla membrana cellulare, nelle giunzioni cellulari, nel reticolo endoplasmatico, nel citoplasma, nel nucleo e nei endosomi precoci. Può anche essere secreto. Questa localizzazione diversificata riflette i suoi ruoli dinamici nel traffico e nella segnalazione.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione (come bersagliata da questo anticorpo), la glicosilazione e l'ubiquitinazione. Queste regolano l'attivazione, il traffico e il ricambio del recettore.
• Il VEGFR-2 è ampiamente espresso, con rilevazione nella cornea e in molti tessuti, sottolineando il suo ampio ruolo nella biologia vascolare.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno, un peptide fosforilato sintetico attorno a Y1175, garantisce la specificità per la forma fosforilata di VEGFR-2. Per il Western blot, considerare di stimolare le cellule con VEGFA per potenziare il segnale di fosforilazione e convalidare con appropriati controlli negativi (lisati non trattati o trattati con fosfatasi).
• Questo anticorpo può essere utilizzato in ELISA; considerare l'ottimizzazione della concentrazione di rivestimento e l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento per un saggio sandwich mirato alla fosfo-VEGFR-2.
• Dato che è riportata la reattività incrociata per umano, topo e ratto, convalidare l'anticorpo nelle specie e nei sistemi tissutali pertinenti. Includere controlli positivi noti, come HUVEC trattate con VEGF per l'umano, o equivalenti cellule endoteliali primarie per topo/ratto.

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