Anticorpo policlonale rabbit anti-Vimentina fosforilata S83 per WB, ELISA - P08670

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione della Vimentina

• La vimentina è una proteina del filamento intermedio di classe III da 54 kDa codificata dal gene VIM (ID gene: 7431) ed è membro della famiglia dei filamenti intermedi. È anche nota con i nomi alternativi CTRCT30 o HEL113.
• Forma reti del citoscheletro prevalentemente nelle cellule mesenchimali e svolge un ruolo fondamentale nel mantenimento della forma cellulare, dell'integrità e fornisce supporto meccanico.
• La vimentina è coinvolta nella migrazione cellulare, nel movimento direzionale, nell'organizzazione dei foglietti cellulari e nella polarizzazione del complesso di Golgi sul fronte di migrazione; può inoltre promuovere la crescita degli assoni e la riparazione delle fibre motorie tramite reclutamento mediato da DSP.
• Interagisce con LARP6 per stabilizzare gli mRNA del collagene di tipo I (COL1A1 e COL1A2), evidenziando il suo ruolo nella regolazione della matrice extracellulare.
• Subcellularmente, la vimentina si localizza nel citoplasma, il citoscheletro, la matrice nucleare, la membrana cellulare e le proiezioni cellulari come gli assoni, e si associa a organelli tra cui il nucleo, il reticolo endoplasmatico e i mitocondri.
• È espressa ad alti livelli nei fibroblasti, con una certa espressione nei linfociti T e B, ed è spesso sovraespressa nelle linee cellulari di carcinoma mammario ormono-indipendente: funge infatti da marcatore per la transizione epiteliale-mesenchimale (EMT).
• La vimentina subisce diverse modifiche post-traduzionali, tra cui la fosforilazione in Ser83 (il sito bersaglio di questo prodotto), acetilazione, glicazione, S-nitrosilazione e coniugazione con ubiquitina, che regolano l'assemblaggio e il disassemblaggio dei filamenti.
• È implicata in patologie come la cataratta ed è nota per interagire con proteine virali (interazione ospite-virus), riflettendo la sua ampia rilevanza funzionale.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico fosforilato corrispondente alla regione intorno alla Ser83 della vimentina umana. Quando si utilizza questo anticorpo policlonale per Western blotting, tenere conto che la fosforilazione in Ser83 può essere influenzata da vie di segnalazione cellulari come quelle coinvolgenti la protein chinasi C o i fattori di crescita.
• Per applicazioni ELISA, assicurarsi che l'antigene presenti l'epitopo fosforilato in una conformazione compatibile con il riconoscimento policlonale e convalidare la rilevazione nella matrice del vostro campione specifico.
• La vimentina è altamente espressa nelle cellule mesenchimali e in alcune linee cellulari tumorali; di conseguenza, controlli positivi come fibroblasti o linee cellulari di carcinoma mammario ormono-indipendente (ad esempio MDA-MB-231) possono essere appropriati per i primi esperimenti.
• La reattività incrociata con il ratto è prevista in base all'omologia di sequenza; si consiglia di confermare la reattività in tessuti o linee cellulari di ratto nelle vostre condizioni sperimentali.
• Il peso molecolare previsto della vimentina è ~54 kDa, ma la fosforilazione e altre modifiche possono causare leggere variazioni; verificare il pattern di bande utilizzando marcatori di peso molecolare appropriati e controlli trattati con fosfatasi.

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