Anticorpo monoclonale coniglio Anti-PI3 Kinasi p110 alfa per WB, IP, ELISA - P42336

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della PI3 Kinasi p110 alfa

• La PI3 Kinasi p110 alfa, codificata dal gene PIK3CA, è la subunità catalitica da 110 kDa del complesso fosfoinositide 3-chinasi (PI3K) di classe I, nota anche come p110alfa.
• Catalizza la fosforilazione del fosfatidilinositolo 4,5-bisfosfato (PIP2) per generare fosfatidilinositolo 3,4,5-trisfosfato (PIP3), un secondo messaggero fondamentale in numerose vie di segnalazione. Riferimenti correlati: PMID:15135396, PMID:28676499
• Il PIP3 recluta proteine contenenti il dominio di omologia alla pleckstrina (PH) come AKT1 e PDPK1 nella membrana plasmatica, innescando cascate a valle che regolano crescita, sopravvivenza, proliferazione e motilità cellulare.
• L'enzima è attivato dai recettori tirosin chinasici (RTK) in risposta a fattori di crescita come EGF, insulina, IGF1, VEGFA e PDGF, svolgendo un ruolo chiave nella segnalazione insulinica e nell'angiogenesi.
• Oltre all'attività lipido-chinasica, la PI3K p110 alfa possiede anche attività serina-proteino chinasica, autofosforila la subunità regolatoria p85 e fosforila substrati come 4EBP1 e H-Ras. Riferimenti correlati: PMID:23936502, PMID:28676499
• La proteina è essenziale per lo sviluppo vascolare e la migrazione delle cellule endoteliali, in particolare tramite la segnalazione VEGFA e la regolazione dell'attività di RhoA; partecipa inoltre alla fagocitosi e alla pinocitosi.
• Le evidenze scientifiche indicano che si tratta di un proto-oncogene con varianti associate a patologie e le mutazioni somatiche in PIK3CA sono osservate frequentemente nei tumori umani, rendendolo un biomarcatore chiave e un bersaglio terapeutico.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per Western blot (WB), è atteso una banda specifica a circa 124 kDa in lisati cellulari o tissutali di uomo, topo e ratto. Validare il caricamento delle proteine e l'efficienza del trasferimento.
• Nell'immunoprecipitazione (IP), validare l'arricchimento della p110 alfa e delle proteine co-immunoprecipitate in condizioni native, tenendo conto della reattività dell'anticorpo con la regione dell'immunogeno (aa 294–610).
• Per ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento e le concentrazioni dell'anticorpo utilizzando p110 alfa ricombinante o estratti cellulari; la reattività crociata con specie roditori garantisce flessibilità nei sistemi modello.
• Dato il ruolo del bersaglio nella via PI3K/AKT, questo anticorpo è consigliato per saggi di studio sulla proliferazione cellulare, la sopravvivenza o l'analisi di biomarcatori tumorali.
• Includere sempre controlli positivi e negativi appropriati per confermare la specificità, specialmente quando si lavorano con campioni che possono contenere altre isoforme della PI3K.

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