Anticorpo Policlonale Anti-PI3 Chinasi p110 beta per WB ed ELISA - P42338

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della PI3 Chinasi p110 beta

• La PI3 Chinasi p110 beta (PIK3CB/PIK3C1) è la subunità catalitica di 110 kDa della fosfoinositide 3-chinasi di classe IA, responsabile della conversione del fosfatidilinositolo 4,5-bisfosfato (PIP2) nel secondo messaggero fosfatidilinositolo 3,4,5-trifosfato (PIP3). Riferimenti correlati:
  PMID:15135396
• Agisce a valle dei recettori accoppiati a proteine G (GPCR) e dei recettori tirosin-chinasici, attivando in modo cruciale AKT1 e regolando crescita, sopravvivenza, proliferazione e migrazione cellulare.
• p110 beta è essenziale per l'adesione e l'aggregazione piastrinica, trasducendo segnali da GPCR, integrina αIIbβ3 e recettori contenenti ITAM, ed è necessaria per la formazione e stabilità del trombo.
• Oltre alla sua attività lipid-chinasica, p110 beta possiede un'attività tirosin/serina-treonina protein-chinasica intrinseca e subisce autofosforilazione, che può modulare le sue funzioni di impalcatura. Riferimenti correlati:
  PMID:12502714
• La proteina si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, suggerendo una partecipazione a eventi di segnalazione in più siti subcellulari.
• p110 beta contribuisce anche all'autofagia modulando i livelli di PtdIns3P e attivando il complesso VPS34, e può funzionare come proteina di impalcatura nella segnalazione insulinica, indipendentemente dalla sua attività chinasica.
• L'attivazione aberrante della PI3K p110 beta è frequentemente associata all'oncogenesi, in particolare nei tumori carenti di PTEN e in modelli guidati da mutazioni di ERBB2 o RAS, sottolineandone la rilevanza terapeutica.
• L'mRNA di PIK3CB è espresso ubiquitariamente nei tessuti umani, in linea con i suoi ruoli fondamentali nella fisiologia cellulare.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante che comprende gli amminoacidi 410–600 di PIK3CB umana, una regione situata all'interno del dominio catalitico; tale progettazione generalmente produce anticorpi in grado di riconoscere la proteina endogena a lunghezza intera.
• La specificità prevista è supportata dalla reattività crociata dell'anticorpo con la PI3K p110 beta di topo e ratto, che condividono un'elevata omologia di sequenza nella regione bersagliata.
• Per il Western blot, attendersi una banda a circa 123 kDa; considerare di testare lisati cellulari totali da linee cellulari con espressione nota di PIK3CB (es. HeLa, MCF7 o lisati piastrinici) e ottimizzare le condizioni di trasferimento e bloccaggio.
• Nelle applicazioni ELISA, utilizzare l'anticorpo come reagente di cattura o rilevamento; validare l'accoppiamento con l'antigene e appropriati anticorpi secondari nel formato di saggio previsto.
• Essendo un anticorpo policlonale, le prestazioni possono variare tra i lotti; includere sempre controlli positivi e negativi e titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale per i propri campioni specifici.

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