Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-PI3 Chinasi p85 alfa per WB, IF, IHC, ELISA - P27986

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della PI3 Chinasi p85 alfa

• Il gene PIK3R1 codifica per la subunità regolatrice p85-alfa della fosfoinositide 3-chinasi (PI3K), che forma un eterodimero con una subunità catalitica p110; lo splicing alternativo produce molteplici isoforme (ad es., l'isoforma 2 è espressa nel muscolo scheletrico e nel cervello).
• p85-alfa agisce come un adattatore che lega, tramite i suoi domini SH2, i residui di tirosina fosforilati sui recettori tirosin-chinasici attivati (ad es., FGFR, KIT, PDGFR) e sulle proteine adattatrici, reclutando la subunità catalitica p110 alla membrana plasmatica per la produzione localizzata di PIP3. Riferimenti correlati: PMID:7518429
• Nei tessuti responsivi all'insulina, p85-alfa è necessaria per la captazione del glucosio e la sintesi del glicogeno stimolate dall'insulina, svolgendo un ruolo critico nella regolazione metabolica.
• La proteina media la segnalazione a valle di molteplici recettori per fattori di crescita, inclusi FGFR1–4, KIT, PDGFRA/B e l'integrina ITGB2, influenzando crescita, sopravvivenza e migrazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:17626883, PMID:19805105, PMID:7518429
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente citoplasmatica, con traslocazione dipendente dallo stimolo alla membrana plasmatica.
• La proteina subisce estese modificazioni post-traduzionali—fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione—che ne modulano finemente l'attività e la stabilità.
• Durante lo stress del reticolo endoplasmatico (ER), p85-alfa promuove la traslocazione nucleare dell'isoforma 2 di XBP1 in modo dipendente dall'insulina o dallo stress del RE, contribuendo a una migliore tolleranza al glucosio sotto sovraccarico metabolico. Riferimenti correlati: PMID:20348923
• L'isoforma 2 è arricchita nel muscolo scheletrico e nel cervello, con livelli inferiori nel rene e nel muscolo cardiaco; sia l'isoforma 2 che l'isoforma 4 sono rilevate a livello proteico nel muscolo scheletrico.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 240–380, una regione contenente il dominio inter-SH2 (iSH2) che media il legame con le subunità catalitiche p110; l'anticorpo può riconoscere epitopi conservati tra le diverse isoforme di p85.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto per p85-alfa è di ~84 kDa; validare con controlli positivi come lisati di HepG2 o 3T3-L1 stimolati con insulina, e includere campioni umani, di topo o di ratto a seconda dei casi.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), le condizioni di recupero dell'antigene dovrebbero essere ottimizzate; l'anticorpo è adatto sia per tessuti congelati (IF-P) che inclusi in paraffina.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, ci si aspetta una colorazione citoplasmatica con possibile arricchimento a livello della membrana in seguito a stimolazione con fattori di crescita.
• Le applicazioni ELISA possono beneficiare di una coppia di anticorpi accoppiati; la reattività incrociata tra uomo, topo e ratto ne amplia l'utilità nei modelli traslazionali.

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