Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-PI3 Chinasi p85 alfa/beta per WB, ELISA - P27986 / O00459

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PI3 Chinasi p85 alfa/beta

• Codificati da PIK3R1 (p85-alfa) e PIK3R2 (p85-beta), queste subunità regolatorie della fosfatidilinositolo 3-chinasi funzionano come proteine adattatrici che collegano la subunità catalitica p110 ai recettori tirosin-chinasici attivati tramite domini SH2.
• Si lega alle protein-tirosin-chinasi attivate tramite il suo dominio SH2, mediando la traslocazione membranale dell'unità catalitica p110. È essenziale per l'assorbimento del glucosio stimolato dall'insulina e la sintesi del glicogeno nei tessuti sensibili all'insulina, e partecipa alle vie di segnalazione a valle di FGFR, KIT e PDGFR. Modula le risposte allo stress ER promuovendo la traslocazione nucleare di XBP1 nel fegato, contribuendo al miglioramento della tolleranza al glucosio. Riferimenti correlati: PMID:17626883 PMID:19805105 PMID:7518429 PMID:20348923
• L'splicing alternativo genera più isoforme; l'isoforma 2 è espressa principalmente nel muscolo scheletrico e nel cervello, con livelli più bassi nel rene e nel muscolo cardiaco.
• La localizzazione subcellulare è principalmente citoplasmatica, dove facilita la trasduzione del segnale dai recettori di membrana agli effettori intracellulari.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che influenzano la sua stabilità e attività. Parole chiave come dominio SH2, dominio SH3, interazione ospite-virus e variante patologica (nanismo) evidenziano i suoi ruoli multifunzionali.
• Agisce come fattore ospite nelle interazioni virali ed è associato a disturbi dello sviluppo come la sindrome SHORT (nanismo).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide compreso tra gli amminoacidi 400–500 di p85 alfa/beta umana, una regione conservata in entrambe le isoforme, che supporta il riconoscimento delle varianti alfa e beta.
• Per Western blot (WB), convalidare l'anticorpo in lisati di linee cellulari umane o murine note per esprimere PI3K p85 (ad esempio HeLa, adipociti 3T3-L1). Bande attese: ~42–54 kDa (prevalentemente p85-alfa) e ~81–84 kDa (p85-beta). Possono comparire bande aggiuntive derivanti da isoforme di splicing o prodotti di degradazione; ottimizzare di conseguenza la preparazione del lisato e il caricamento del campione.
• Per ELISA, valutare l'abbinamento con un anticorpo di cattura/detezione convalidato dopo test interni. Verificare la reattività crociata con isoforme correlate e utilizzare condizioni di bloccaggio e lavaggio appropriate per minimizzare il fondo.
• Poiché la reattività crociata è indicata per uomo e mouse, la conservazione della sequenza bersaglio deve essere verificata in caso di estensione ad altre specie; eseguire l'allineamento della sequenza prima dell'applicazione.

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