Anticorpo monoclonale anti-PI3 Kinasi p85 beta per WB, ELISA - O00459

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della PI3 Kinasi p85 beta

• Codificata dal gene PIK3R2, la subunità regolatoria beta della fosfatidilinositolo 3-chinasi (nota anche come p85β, p85-BETA) è una subunità regolatoria fondamentale delle PI3K di classe IA, formando eterodimeri con le subunità catalitiche p110 per regolare la segnalazione a valle.
• In qualità di subunità regolatoria, media la via PI3K legandosi alle tirosin-chinasi fosforilate tramite i suoi domini SH2 e reclutando la subunità catalitica alla membrana plasmatica, dove fosforila PtdIns(4,5)P2 per generare PIP3, un secondo messaggero fondamentale che attiva AKT e PDK1, promuovendo la crescita, la sopravvivenza e la proliferazione cellulare.
• Regola indirettamente l'autofagia, un processo di degradazione cellulare, come dimostrato da studi funzionali (PubMed:23604317). Riferimenti correlati: PMID:23604317
• Promuove la traslocazione nucleare dell'isoforma XBP1 sottoposta a splicing in risposta allo stress del reticolo endoplasmatico e alla segnalazione insulinica nel fegato, contribuendo a migliorare la tolleranza al glucosio (per analogia). Ciò evidenzia il suo ruolo nella regolazione metabolica e nelle risposte allo stress.
• Le mutazioni in PIK3R2 sono associate alla sindrome megalencefalia-polimicrogiria-polidattilia-idrocefalo (MPPH), un disturbo dello sviluppo cerebrale (indicato dalla parola chiave "Disease variant" in UniProt).
• Le modifiche post-traduzionali includono l'ubiquitinazione (coniugazione Ubl) e la fosforilazione (fosfoproteina), che possono regolarne la stabilità, l'attività e le interazioni.
• Parole chiave aggiuntive: attivazione delle GTPasi, trasporto delle proteine e risposta allo stress, a sottolineare il suo coinvolgimento in diversi processi cellulari, tra cui la dinamica del citoscheletro e il traffico intracellulare.
• In quanto componente del proteoma di riferimento e bersaglio dell'identificazione proteomica, la p85β è ampiamente studiata nella ricerca sulla segnalazione cellulare e sul cancro.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato è un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 100-200 della p85β umana (O00459). Per il Western blot (WB), si prevede una banda intorno a 82 kDa; si consiglia di utilizzare controlli positivi appropriati (ad esempio lisati cellulari umani o di ratto noti per esprimere componenti della segnalazione PI3K) e di convalidare la specificità dell'anticorpo con campioni knockout o knockdown, se disponibili.
• Per le applicazioni ELISA, si raccomanda di ottimizzare la concentrazione dell'antigene di rivestimento e la diluizione dell'anticorpo. È riportata una reattività crociata con campioni di ratto, ma le prestazioni in altre specie devono essere verificate indipendentemente.
• Dato il ruolo della p85β nella segnalazione PI3K/AKT, questo anticorpo può essere utile nello studio delle vie correlate al cancro, al metabolismo e ai disturbi dello sviluppo neurologico. Può essere utilizzato insieme ad anticorpi fosfospecifici o inibitori per analizzare gli stati di attivazione.
• Pre-bagnare sempre la membrana PVDF e utilizzare condizioni appropriate di blocco e lavaggio per ridurre al minimo il fondo. Si consiglia di utilizzare un controllo di caricamento come la β-actina o la GAPDH per la normalizzazione.

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