Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-PI3 Chinasi p85 beta per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O00459

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della PI3 Chinasi p85 beta

• Codificata dal gene PIK3R2, la PI3 Chinasi p85 beta (sottounità regolatoria beta della fosfatidilinositolo 3-chinasi) è una sottounità regolatoria di 85 kDa della PI3K di classe IA.
• Si associa alla sottounità catalitica p110 per formare la PI3K attiva, che fosforila il PtdIns(4,5)P2 per produrre il secondo messaggero PIP3 a livello della membrana plasmatica.
• Il PIP3 recluta proteine contenenti il dominio PH come AKT1 e PDPK1, attivando cascate di segnalazione che guidano crescita, sopravvivenza, proliferazione, motilità e morfologia cellulare.
• Attraverso il suo dominio SH2, la p85 beta si lega a proteine tirosin-chinasiche fosforilate (es. recettori dei fattori di crescita attivati), funzionando come adattatore per localizzare la sottounità catalitica p110 alla membrana.
• È stato dimostrato che regola indirettamente l'autofagia (PubMed:23604317). Riferimenti correlati: PMID:23604317
• La p85 beta promuove la traslocazione nucleare dell'isoforma 2 di XBP1 sotto stress del reticolo endoplasmatico e/o stimolazione insulinica nel fegato, contribuendo così a migliorare la tolleranza al glucosio.
• La proteina contiene domini SH2 e SH3, viene fosforilata in seguito all'attivazione della PI3K e può subire coniugazione con ubiquitina; mutazioni sono associate a varianti patologiche.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1–85) della p85 beta umana; questa regione potrebbe essere meno conservata, potenzialmente fornendo specificità per l'isoforma, ma la reattività crociata con la p85 alfa dovrebbe essere considerata e validata nel sistema campione rilevante.
• Per il WB, utilizzare lisati cellulari totali da linee cellulari o tessuti umani, di topo o di ratto; la banda attesa è di circa 82 kDa. Si raccomanda un controllo positivo (es. lisato di HeLa o NIH/3T3).
• Per IHC-P e IF/ICC potrebbe essere necessaria l'ottimizzazione del recupero dell'antigene (buffer citrato mediato da calore, pH 6.0) e della permeabilizzazione (0.1% Triton X-100). Validare la specificità del segnale utilizzando un peptide bloccante o controlli knockout.
• In ELISA, questo anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; per saggi quantitativi è necessario abbinarlo a un adeguato anticorpo di rilevamento per p85 beta.
• Poiché la p85 beta è una proteina intracellulare ubiquitariamente espressa, assicurarsi una corretta fissazione e permeabilizzazione per IF/ICC, e considerare la co-colorazione con marcatori specifici per compartimento per confermare la localizzazione.

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