Anticorpo policlonale Anti-PI3K p85α/p55γ/p85β per WB, IF/ICC, ELISA - P27986 / O00459 / Q92569

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: PI3K p85α/p55γ/p85β (PIK3R1/PIK3R2/PIK3R3) Funzione e localizzazione

• Le subunità regolatorie PI3K p85α (PIK3R1), p55γ (PIK3R3) e p85β (PIK3R2) sono adattatori non catalitici che collegano la subunità catalitica p110 ai recettori tirosin chinasi attivati. p85α contiene due domini SH2 e un dominio SH3, legando residui di tirosina fosforilata su recettori come FGFR, KIT, PDGFR e integrina β2 (ITGB2), mediando così il reclutamento e l'attivazione della PI3K di membrana. Riferimenti correlati: PMID:17626883 PMID:19805105 PMID:7518429
• La subunità p85α svolge un ruolo essenziale nella segnalazione dell'insulina, promuovendo l'assorbimento di glucosio e la sintesi del glicogeno nei tessuti sensibili all'insulina, e modula la risposta cellulare allo stress ER facilitando la translocazione nucleare dell'isoforma 2 di XBP1 durante il sovraccarico metabolico nel fegato. Riferimenti correlati: PMID:20348923
• Queste subunità regolatorie esistono come multiple isoforme: PIK3R1 produce le isoforme p85α, p55α e p50α tramite splicing alternativo, mentre PIK3R2 codifica per p85β e PIK3R3 codifica per p55γ. L'isoforma 2 (p50α) di PIK3R1 è espressa prevalentemente nel muscolo scheletrico e nel cervello, con livelli inferiori nel rene e nel muscolo cardiaco.
• A livello subcellulare, la proteina p85α si localizza principalmente nel citoplasma, dove interagisce sia con i complessi recettoriali che con la subunità catalitica p110.
• Le modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, regolano la stabilità e la segnalazione di p85α; la proteina è anche un noto fattore ospite per le interazioni virali (PAROLE CHIAVE: Acetilazione, Fosfoproteina, Coniugazione Ubl, Interazione ospite-virus).
• I pesi molecolari previsti riflettono la diversità delle isoforme: p85α e p85β migrano a circa 81–84 kDa, mentre le isoforme più corte p55γ e p50α vengono rilevate intorno a 42–54 kDa.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è stato progettato utilizzando una sequenza peptidica conservata all'interno degli amminoacidi 400–500, condivisa tra PIK3R1, PIK3R2 e PIK3R3, consentendo il riconoscimento di multiple isoforme della subunità regolatrice e la reattività crociata con campioni umani, di topo e di ratto.
• Per il Western blotting (WB), validare la diluizione dell'anticorpo primario nel proprio specifico sistema di campioni; un intervallo iniziale di 1:500–1:2000 è spesso utilizzato per i policlonali di coniglio, ma l'ottimizzazione è fondamentale per risolvere le bande previste a ~42–54 kDa (p55γ/p50α) e ~81–84 kDa (p85α/p85β).
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), includere controlli appropriati (es. IgG di coniglio non immunizzato) e considerare protocolli di permeabilizzazione che preservino gli epitopi citoplasmatici.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; accoppiarlo con un anticorpo appropriato della subunità catalitica p110 per impostare formati a sandwich per studiare la dinamica dell'interazione PI3K.

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