Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-PIEZO1 (FAM38A) per WB, IF/ICC, ELISA - Q92508

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PIEZO1 (FAM38A)

• PIEZO1 (Proteina FAM38A, Mib) è una subunità formante pori del canale cationico aspecifico meccanosensibile, essenziale per la percezione del tatto e del dolore tattile.
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• Il canale si assembla come un'elica a tre pale omotrimerica, utilizzando un meccanismo di gate a movimento a cappuccio e tipo "plug-and-latch" per controllare l'afflusso di ioni.
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• La conduttanza è massima per K+, intermedia per Na+ e minima per Li+; gli ioni divalenti permeano lentamente e possono sopprimere i flussi di K+. Il canale è inibito dal rosso di rutenio e dal gadolinio.
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• La localizzazione primaria include la membrana del reticolo endoplasmatico (ER), il compartimento intermedio ER-Golgi e la membrana plasmatica; è rilevato anche nella membrana del lamellipodio.
• Svolge un ruolo chiave nell'adesione delle cellule epiteliali mantenendo l'attivazione dell'integrina attraverso il reclutamento di R‑Ras e la segnalazione della calpaina a livello dell'ER.
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  PMID:20016066
• Agisce come sensore dello stress di taglio nelle cellule endoteliali, promuovendo l'allineamento cellulare lungo il flusso sanguigno tramite l'attivazione della calpaina.
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• Nei mioblasti, percepisce il flip-flop della fosfatidilserina e innesca la segnalazione Ca2+-dipendente della Rho GTPasi, portando all'assemblaggio dell'actomiosina e alla formazione dei miotubi.
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• Espressione tissutale: diffusa, inclusi neuroni, eritrociti e mioblasti; nella malattia di Alzheimer, espresso negli astrociti attivati attorno alle placche senili.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 2230–2420 all'interno della regione intracellulare C‑terminal; considerare l'uso di questo anticorpo per sondare epitopi C‑terminali o rilevare frammenti ricombinanti di PIEZO1.
• Per il Western blot, notare che PIEZO1 ha una massa prevista di ~287 kDa; utilizzare un gel SDS‑PAGE a bassa percentuale (es. 6–8%) e ottimizzare le condizioni di trasferimento (es. tempo prolungato, metanolo basso) per proteine ad alto peso molecolare.
• Per immunofluorescenza/ICC, osservare la colorazione citoplasmatica punteggiata (ER/Golgi) così come la localizzazione sulla membrana plasmatica e lamellipodiale; co-colorare con marcatori di organelli e convalidare con controlli appropriati.
• Nelle applicazioni ELISA, le prestazioni possono dipendere dalla conformazione della proteina target; considerare l'uso di standard proteici ricombinanti o campioni positivi noti per la calibrazione del saggio.

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