Anticorpo policlonale di coniglio anti-PIF4 per WB ed ELISA - Q8W2F3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del fattore di trascrizione PIF4

• Il fattore di trascrizione PIF4, noto anche come AtPIF4, bHLH9, EN102 e SRL2, è una proteina basica elica-giro-elica codificata dal gene PIF4 in Arabidopsis thaliana. Integra i segnali luminosi e termici per regolare la crescita.
• Agisce negativamente nella segnalazione del fitocromo B, controllando l'espressione dei geni coinvolti nell'espansione cellulare attraverso il legame ai motivi G-box (per similarità).
• Viene attivato dalle criptocromi CRY1 e CRY2 in condizioni di bassa luminosità blu, legandosi direttamente alle varianti E-box (5'-CA[CT]GTG-3') nella cromatina per stimolare l'espressione genica necessaria a risposte adattative come l'allungamento dell'ipocotile. Riferimenti correlati: PMID:26724867
• Collabora con il coattivatore trascrizionale PTAC12/HMR/PAP5 e con la subunità MED14 del mediatore per regolare i geni della crescita termoresponsiva, principalmente quelli coinvolti nella biosintesi e nella segnalazione dell'auxina, promuovendo la termomorfogenesi, come l'allungamento dell'ipocotile alle alte temperature. Riferimenti correlati: PMID:30635559 PMID:33824329 PMID:36063057
• È localizzato esclusivamente nel nucleo, in linea con il suo ruolo di fattore di trascrizione.
• È espresso prevalentemente in foglie, fusti e plantule, con livelli inferiori in frutti, fiori e radici, a indicare la sua importanza nella crescita vegetativa.
• È soggetto a splicing alternativo, generando varianti proteiche che possono modulare finemente la sua attività nei diversi contesti di sviluppo e ambientali.
• Peso molecolare: 48,4 kDa (calcolato dalla sequenza); annotato come proteoma di riferimento e coinvolto nella segnalazione dei fitocromi, nella regolazione della trascrizione e nelle risposte allo stress.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato è un peptide sintetico comprendente gli amminoacidi 300-400 di PIF4 di Arabidopsis (NP_565991.2). Data la natura policlonale di questo anticorpo, può riconoscere più epitopi e potenzialmente reagire in modo crociato con proteine bHLH strettamente correlate; si raccomanda la validazione nel sistema sperimentale specifico.
• Per il Western blot, utilizzare estratti totali cellulari o arricchiti in frazione nucleare provenienti da tessuti di Arabidopsis thaliana, come plantule o foglie, nei quali PIF4 è altamente espresso. Per una rilevazione ottimale potrebbe essere necessario ottimizzare il blocco e la diluizione dell'anticorpo.
• Questo anticorpo è adatto all'ELISA, che può essere utilizzato per la rilevazione quantitativa dei livelli della proteina PIF4 nei lisati vegetali. Per una quantificazione accurata, si consiglia di utilizzare una curva standard con proteina PIF4 ricombinante.
• Poiché PIF4 svolge una funzione nelle vie di segnalazione della luce e della temperatura, le condizioni sperimentali (regime luminoso, temperatura) devono essere controllate attentamente per evitare modulazioni indesiderate dell'espressione di PIF4.
• Il peso molecolare previsto è di 48 kDa; monitorare la presenza di eventuali bande di degradazione e includere inibitori delle proteasi durante la preparazione dei campioni.

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