Anticorpo policlonale di coniglio anti-PIGP per WB ed ELISA - P57054

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PIGP

• PIGP, noto anche come subunità P della fosfatidilinositolo N-acetilglucosaminiltransferasi, proteina 5 della regione critica della sindrome di Down (DSCR5) e DCRC, è codificato dal gene PIGP.
• È un componente del complesso della glicosilfosfatidilinositolo-N-acetilglucosaminiltransferasi (GPI-GnT), che catalizza il trasferimento della N-acetilglucosamina dall'UDP-N-acetilglucosamina al fosfatidilinositolo, la prima fase della biosintesi dell'ancora GPI.
• In quanto proteina transmembrana, PIGP si localizza nelle membrane cellulari, dove partecipa alle fasi iniziali dell'assemblaggio dell'ancora GPI.
• L'espressione di PIGP è ubiquitaria nei tessuti umani, a conferma del suo ruolo fondamentale nei processi cellulari di base.
• La proteina appartiene alla famiglia PIGP e si prevede che possieda eliche transmembrana; la sua isoforma canonica ha un peso molecolare di circa 18 kDa.
• Le mutazioni di PIGP sono associate all'encefalopatia dello sviluppo e epilettica di tipo 55 (DEE55), sottolineandone l'importanza nello sviluppo neurologico.
• Lo splicing alternativo genera più isoforme e la proteina è stata identificata mediante analisi proteomica; in UniProt non sono annotate modifiche post-traduzionali specifiche.
• Parole chiave: biosintesi dell'ancora GPI, membrana, elica transmembrana, epilessia, variante patologica, splicing alternativo.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di 18 kDa; tuttavia, a causa dello splicing alternativo o di potenziali modifiche post-traduzionali, si possono osservare più bande. Validare utilizzando controlli appropriati.
• Questo anticorpo policlonale è stato prodotto utilizzando un immunogeno ricombinante (aa 25-158) ed è adatto sia per WB sia per ELISA. Valutare l'ottimizzazione dei fattori di diluizione, ad esempio iniziando da 1:500-1:2000 per WB e da 1:1000-1:5000 per ELISA, in base al proprio sistema sperimentale.
• La reattività crociata con il topo è stata confermata; durante i test su altre specie, validare la reattività nel sistema campione pertinente.
• Poiché PIGP è una proteina di membrana, l'arricchimento delle frazioni di membrana può migliorare la sensibilità di rilevazione nel WB. Includere inoltre controlli di caricamento, come GAPDH e β-actina, e controlli negativi, come lisati knockout per PIGP, se disponibili.
• Per le applicazioni ELISA, valutare l'utilizzo dell'anticorpo in un saggio sandwich o diretto, utilizzando una proteina PIGP ricombinante o un peptide come standard.

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