Anticorpo policlonale coniglio anti-PIK3C2A per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - O00443

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PIK3C2A

• PIK3C2A codifica per la subunità catalitica della fosfoinositide 3-chinasi di classe II C2 alfa (PI3K-C2α), una chinasi lipidica che genera i secondi messaggeri fosfatidilinositolo 3-fosfato (PtdIns3P) e fosfatidilinositolo 3,4-bisfosfato (PtdIns(3,4)P2).
• Gioca un ruolo centrale nel traffico intracellulare, inclusa la formazione di vescicole endocitiche rivestite di clatrina, l'endocitosi indipendente dalla dinamina e il traffico dei componenti ciliari.
• Media la segnalazione dell'insulina e l'omeostasi del glucosio: richiesto per la traslocazione di GLUT4 alla membrana plasmatica e l'assorbimento del glucosio, e partecipa alla secrezione di insulina indotta dal glucosio tramite l'attivazione di AKT1 e l'esocitosi dei granuli insulinici.
• La localizzazione subcellulare include la membrana cellulare, le vescicole rivestite di clatrina, il citoplasma, il nucleo, l'apparato di Golgi e la rete trans-Golgi, riflettendo le sue funzioni dinamiche di traffico.
• È coinvolto nella regolazione della ciliogenesi e del traffico dei componenti ciliari. Riferimenti correlati: PMID:31034465
• È espresso in una varietà di tessuti, con i livelli più alti nel cuore, nella placenta e nell'ovaio; rilevato anche nelle cellule endoteliali, nel muscolo liscio e nelle isole pancreatiche, con espressione ridotta nelle isole diabetiche di tipo 2.
• Le modificazionipost-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione; le parole chiave evidenziano anche associazioni patologiche (cataratta, nanismo) sebbene i dettagli meccanicistici siano limitati.
• Lo splicing alternativo produce multiple isoforme, potenzialmente con ruoli funzionali distinti.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1–200) di PIK3C2A umano; può rilevare tutte le isoforme conosciute, ma si consiglia la verifica con controlli specifici per isoforma.
• Il peso molecolare previsto è di ~191 kDa; per il western blotting, utilizzare un gel SDS-PAGE al 6–8% e ottimizzare le condizioni di trasferimento per proteine ad alto peso molecolare.
• Le applicazioni validate (WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA) sono per campioni umani, murini e di ratto; ogni saggio potrebbe richiedere un'ottimizzazione individuale delle diluizioni dell'anticorpo e dei protocolli di rilevamento.
• Per l'immunoistochimica su sezioni paraffinate, potrebbe essere necessaria il recupero dell'antigene (indotto dal calore o enzimatico); considerare di testare entrambi i metodi.
• Nell'immunofluorescenza, la colocalizzazione con marcatori di organelli (es. TGN46, clatrina) può confermare la distribuzione subcellulare prevista.
• La stimolazione con insulina o trattamenti correlati possono rivelare risposte di traslocazione dinamica in modelli cellulari appropriati, dato il ruolo di PIK3C2A nella segnalazione dell'insulina.

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