Anticorpo Policlonale Anti-PIK3CA per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42336

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PIK3CA

• PIK3CA codifica la sottounità catalitica p110-alfa di PI3K, una chinasi lipidica che fosforila il fosfatidilinositolo 4,5-bisfosfato (PtdIns(4,5)P2) per generare il fosfatidilinositolo 3,4,5-trisfosfato (PIP3), un importante secondo messaggero.
  Riferimenti correlati: PMID:15135396, PMID:23936502, PMID:28676499
• PIP3 recluta proteine contenenti domini di omologia pleckstrina (PH) come AKT1 e PDPK1 alla membrana, avviando cascate di segnalazione che promuovono la crescita cellulare, la proliferazione, la sopravvivenza, la motilità e la riorganizzazione del citoscheletro.
• PIK3CA displays attività intrinseca di chinasi serina-proteica, consentendo l'autofosforilazione della sottounità regolatoria p85-alfa e la fosforilazione di substrati come 4EBP1 e H-Ras, potenzialmente modulando le vie a valle.
  Riferimenti correlati: PMID:23936502, PMID:28676499
• Viene attivato dai recettori tirosin chinasi (es. EGFR, recettore dell'insulina, VEGFR) e RAS, svolgendo ruoli essenziali nella segnalazione dei fattori di crescita, nell'angiogenesi e nello sviluppo vascolare.
• PIK3CA è classificato come un proto-oncogene; mutazioni somatiche gain-of-function sono frequentemente rilevate in un'ampia gamma di tumori umani, guidando l'attivazione incontrollata della via PI3K/AKT.
• La proteina è anche implicata nella fagocitosi e nella pinocitosi, sebbene i meccanismi esatti rimangano parzialmente caratterizzati (Per similarità).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 401–600 di PIK3CA umano; questa regione centrale è ben conservata tra umano, mouse e ratto, coerente con la reattività crociata riportata.
• Per il Western blot, PIK3CA migra con un peso molecolare previsto di ~124 kDa; assicurare una sufficiente risoluzione dell'elettroforesi su gel e del trasferimento.
• Validare le prestazioni dell'anticorpo in lisati di controllo positivi pertinenti (es. linee cellulari tumorali che sovraesprimono PIK3CA o stimolate con fattori di crescita) prima dell'uso nei campioni sperimentali.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), ottimizzare i protocolli di recupero dell'antigene (es. recupero dell'epitopo indotto dal calore) e considerare la titolazione della concentrazione dell'anticorpo per ottenere una colorazione specifica.
• Dato che PIK3CA è coinvolto in numerose reti di segnalazione, includere appropriati inibitori della via negli studi funzionali se si utilizza l'anticorpo per la codeteczione o il pull-down.

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