Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-PIM1 per WB, IHC-P, ELISA - P11309

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PIM1

• PIM1 è una serina/treonina proteinchinasi che agisce come protooncogene, promuovendo la sopravvivenza e la proliferazione cellulare e fornendo un vantaggio selettivo nella tumorigenesi. Riferimenti correlati: PMID:15528381, PMID:1825810, PMID:31548394
• Esercita la sua attività oncogenica regolando l'attività trascrizionale di MYC e fosforilando/inibendo le proteine proapoptotiche BAD, MAP3K5 e FOXO3. Riferimenti correlati: PMID:18593906
• PIM1 fosforila MAP3K5, riducendo la sua attività chinasi e inibendo l'attivazione della caspase-3 e l'apoptosi mediata da JNK/p38MAPK a valle. Riferimenti correlati: PMID:19749799
• La chinasi promuove la progressione del ciclo cellulare nelle transizioni G1-S e G2-M fosforilando CDC25A e CDC25C, e regola la stabilità e la localizzazione di CDKN1A e CDKN1B. Riferimenti correlati: PMID:16356754, PMID:12431783, PMID:18593906
• PIM1 può influenzare la struttura della cromatina tramite la fosforilazione di HP1 gamma/CBX3 e regola positivamente la segnalazione di mTORC1 fosforilando e inibendo DEPDC5. Riferimenti correlati: PMID:10664448, PMID:31548394
• Fosforila e attiva ABCG2, contribuendo alla resistenza farmacologica, e agisce come regolatore negativo dell'immunità innata fosforilando GBP1. Riferimenti correlati: PMID:18056989, PMID:37797010
• PIM1 si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nella membrana cellulare. È espresso prevalentemente nei tessuti ematopoietici e germinali, e le sue isoforme sono state rilevate nel cancro della prostata.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno utilizzato è un peptide sintetico corrispondente alla regione N-terminale (aa 1-100) della PIM1 umana. Questa regione è conservata in uomo, topo e ratto, e contribuisce alla reattività crociata. Se necessario, verificare l'omologia di sequenza per altre specie.
• Per il Western blotting (WB) è prevista una banda specifica a circa 36 kDa. Includere controlli positivi (ad esempio HeLa, Jurkat) e negativi appropriati per confermare la specificità.
• Per l'immunohistochimica (IHC-P) possono essere necessari metodi standard di recupero dell'antigene. Valutare la sperimentazione di diversi buffer di recupero e ottimizzare la diluizione dell'anticorpo in base al tipo di tessuto.
• In ELISA, utilizzare proteina PIM1 ricombinante o purificata come antigene di rivestimento. Eseguire titolazioni a scacchiera per determinare le concentrazioni ottimali di anticorpo e antigene.
• Poiché la proteina è coinvolta in molteplici percorsi di segnalazione, i risultati devono essere validati con approcci complementari come il knockdown mediato da siRNA o i saggi di sovraespressione.

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