Anticorpo Policlonale Anti-PIP4K2B per WB, ELISA - P78356

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PIP4K2B

• PIP4K2B (Fosfatidilinositolo 5-fosfato 4-chinasi di tipo-2 beta) è un membro della famiglia delle chinasi lipidiche PIP4K. Nomi alternativi includono PIP5K2B, PIP5KIIbeta e PI5P4KB.
• Catalizza la fosforilazione del fosfatidilinositolo 5-fosfato (PI(5)P) per generare fosfatidilinositolo 4,5-bisfosfato (PtdIns(4,5)P2), un fosfoinositide critico nella trasduzione del segnale. Riferimenti correlati: PMID:26774281, PMID:9038203
• PIP4K2B mostra una preferenza per il GTP rispetto all'ATP nella fosforilazione di PI(5)P, e la sua attività chinasica è modulata dai livelli fisiologici di GTP, collegandola al rilevamento metabolico. Riferimenti correlati: PMID:26774281
• L'enzima regola negativamente la segnalazione insulinica attraverso un meccanismo indipendente dalla catalisi, interagendo con le PIP5K per sopprimere la sintesi di PtdIns(4,5)P2 e la successiva conversione in PtdIns(3,4,5)P3. Riferimenti correlati: PMID:31091439
• A livello subcellulare, PIP4K2B si localizza sulla membrana del reticolo endoplasmatico, membrana cellulare, nucleo e citoplasma, indicando ruoli versatili in diversi compartimenti.
• L'espressione tissutale è elevata nel cervello, cuore, pancreas, muscolo scheletrico e rene, con livelli più bassi in placenta, polmone e fegato.
• Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione, coniugazione con ubiquitina e splicing alternativo, suggerendo meccanismi regolatori complessi.

Linee Guida Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla forma a lunghezza intera (aa 1-270) di PIP4K2B umano, che può riconoscere più isoforme; convalidare la specificità nel sistema di campioni rilevante.
• Per il Western blot (WB), considerare l'uso di condizioni riducenti e controlli appropriati, poiché il peso molecolare previsto è ~47 kDa; la migrazione effettiva può variare a causa di modifiche.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere l'ottimizzazione dell'antigene di rivestimento e della diluizione dell'anticorpo; la reattività incrociata con altre isoforme di PIP4K dovrebbe essere valutata se necessario.
• Poiché l'anticorpo è policlonale di coniglio, la consistenza da lotto a lotto deve essere verificata per saggi quantitativi; considerare l'uso di anticorpi di rilevamento accoppiati per lo sviluppo di ELISA sandwich.
• Poiché l'espressione di PIP4K2B varia tra i tessuti, selezionare il lisato cellulare o tissutale appropriato in base alla specificità tissutale riportata (es. cervello, cuore, pancreas) per i controlli positivi.

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