Anticorpo policlonale di coniglio Anti-PITX2 (Pituitary homeobox 2) per WB, ELISA - Q99697

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PITX2

• PITX2 (pituitary homeobox 2) è un fattore di trascrizione a homeodominio di tipo accoppiato, noto anche come ARP1, RIEG, RIEG1, PtX2 o Solurshin, codificato dal gene PITX2 nell'uomo.
• Svolge un ruolo nella differenziazione dei mioblasti: quando non è fosforilato, interagisce con ELAVL1 per stabilizzare l'mRNA di CCND1, promuovendo la proliferazione; la fosforilazione mediata da AKT2 rompe questo complesso, portando alla degradazione dell'mRNA di CCND1 e alla differenziazione.
• PITX2 è fondamentale per la definizione dell'asimmetria sinistra-destra durante lo sviluppo embrionale, influenzando il posizionamento e la morfogenesi degli organi.
• La proteina contiene un dominio homeobox conservato per il legame al DNA che le permette di regolare l'espressione dei geni bersaglio.
• La localizzazione subcellulare comprende sia il nucleo che il citoplasma; il traffico nucleocitoplasmatico può modulare la sua attività in risposta a segnali di trasduzione.
• Si tratta di una fosfoproteina, in cui la fosforilazione da parte di AKT2 funge da interruttore regolatorio chiave tra proliferazione e differenziazione.
• Le mutazioni in PITX2 sono associate a disordini della disgenesi del segmento anteriore, tra cui l'anomalia di Peters, la sindrome di Rieger tipo 1 e altri difetti dello sviluppo oculare (ASGD4).
• Vari isoforme sono prodotte da splicing alternativo, che possono presentare distribuzioni tissutali e funzioni distinte.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1–100) del PITX2 umano, che si prevede sia accessibile sia in condizioni native sia denaturanti, supportando l'uso in Western blot (WB) e ELISA.
• Per il WB, ci si aspetta una banda di circa 35 kDa; a causa di possibili modifiche post-traduzionali o variabilità delle isoforme, si possono osservare bande aggiuntive. Validare con controlli positivi e negativi appropriati da linee cellulari o tessuti rilevanti.
• È stata riportata reattività crociata con topo e ratto; tuttavia, si consiglia un allineamento di sequenza tra le specie per confermare la conservazione dell'epitopo per la tua specifica applicazione.
• Essendo un anticorpo policlonale di coniglio, può riconoscere più isoforme e modifiche post-traduzionali, offrendo un rilevamento più ampio ma richiedendo un'attenta validazione della specificità.
• Per l'ELISA, si consiglia di utilizzare antigeni di coating a base di peptidi o proteina PITX2 ricombinante; è consigliata l'ottimizzazione dei buffer di coating e delle diluizioni dell'anticorpo.
• Includere campioni non trattati e stimolati con AKT2 per valutare i cambiamenti conformazionali fosfo-sensibili se si studia l'asse regolatorio di AKT2.

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