Anticorpo monoclonale anti-PKA C-alfa (PRKACA) (validato mediante KD) per WB, ELISA - P17612

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della PKA C-alfa (PRKACA)

• PRKACA codifica la subunità catalitica alfa della protein-chinasi cAMP-dipendente, una chinasi serina/treonina. Esistono due isoforme: l'isoforma 1 ubiquitariamente espressa e l'isoforma 2 specifica degli spermatozoi, arricchita negli spermatociti pachitenici.
• Fosforila un'ampia gamma di substrati nel citoplasma e nel nucleo, regolando la progressione del ciclo cellulare, la trascrizione e l'apoptosi. Riferimenti correlati: PMID:15642694, PMID:15905176, PMID:16387847
• Regola la funzione piastrinica: mantiene lo stato di riposo attraverso il complesso NF-kappa-B, mentre la trombina/il collagene attivano PRKACA per fosforilare VASP, promuovendo l'aggregazione piastrinica. Riferimenti correlati: PMID:15642694, PMID:20356841
• Inibitore chiave della segnalazione di smoothened: fosforila i fattori di trascrizione GLI, promuovendone l'elaborazione e il silenziamento dei geni bersaglio; l'interazione con SMO sequestra PRKACA nella membrana. Riferimenti correlati: PMID:16705181, PMID:36202993, PMID:39138140
• Si localizza in diversi compartimenti: citoplasma, nucleo, membrana cellulare, mitocondri, ciglia e vescicole secretorie.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la miristoilazione N-terminale e molteplici siti di fosforilazione, che influenzano l'attività e la localizzazione.
• Associazione con patologie: le mutazioni sono collegate alla sindrome di Cushing (PPNAD4).

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla PRKACA umana ricombinante a lunghezza intera; questo design può fornire una copertura completa degli epitopi e supportare il rilevamento di entrambe le isoforme e la reattività crociata con topo e ratto.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 41 kDa; validare utilizzando controlli positivi appropriati (ad esempio HeLa, HEK293 o tessuti che esprimono PRKACA).
• Per l'ELISA, considerare l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento diretto contro un epitopo non sovrapposto per sviluppare saggi sandwich.
• La validazione mediante knockdown (validato mediante KD) indica che l'anticorpo può essere utilizzato per confermare la specificità verso il bersaglio tramite esperimenti di knockdown con siRNA/shRNA; includere controlli pertinenti del knockdown.

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