Anticorpo monoclonale Anti-PKA C-alfa (PRKACA) convalidato KD per WB, IF/ICC, ELISA - P17612

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PKA C-alfa (PRKACA)

• PRKACA codifica per la subunità catalitica alfa della proteina chinasi dipendente da cAMP (PKA), una serina/treonina chinasi che fosforila numerosi substrati citoplasmatici e nucleari, svolgendo un ruolo centrale nelle cascate di segnalazione del cAMP (PubMed:15642694, PubMed:15905176, PubMed:16387847). Riferimenti correlati: PMID:15642694 PMID:15905176 PMID:16387847

• L'enzima modula la struttura della cromatina e la trascrizione fosforilando l'istone H1.4 e la subunità p50 di NF-kappa-B (NFKB1), influenzando l'espressione genica e l'attività di legame al DNA (PubMed:15178447, PubMed:15642694, PubMed:15905176). Riferimenti correlati: PMID:15178447 PMID:15642694 PMID:15905176

• Nelle piastrine, PRKACA fosforila VASP per mantenere le piastrine circolanti in stato di riposo; in seguito alla disruzione da parte della trombina o del collagene, PRKACA attiva libera promuove l'aggregazione piastrinica (PubMed:15642694, PubMed:20356841). Riferimenti correlati: PMID:15642694 PMID:20356841

• PRKACA agisce come inibitore chiave della via di segnalazione di Smoothened fosforilando i fattori di trascrizione GLI (GLI1, GLI2, GLI3), promuovendone il processo e prevenendo l'attivazione dei geni bersaglio in assenza di ligandi Hedgehog (PubMed:16705181, PubMed:36202993, PubMed:39138140). Riferimenti correlati: PMID:16705181 PMID:36202993 PMID:39138140

• Subcellularmente, PRKACA si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nella membrana cellulare, nei mitocondri e in proiezioni specifiche come ciglia e flagelli, riflettendo i suoi diversi ruoli regolatori. L'espressione tissutale è specifica per isoforma: l'isoforma 1 è ubiquitaria, mentre l'isoforma 2 è specifica dello sperma e arricchita negli spermatociti in pachite.

• Modifiche post-traduzionali come la miristoilazione N-terminale e la fosforilazione regolano la sua attività catalitica, il targeting subcellulare e la stabilità. Lo splicing alternativo dà origine alle diverse isoforme distinte.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Questo anticorpo è stato generato utilizzando proteina PRKACA umana ricombinante; reagisce in modo crociato con uomo, topo e ratto, rendendolo adatto per studi su queste specie. Convalidare i livelli di espressione endogena nel vostro sistema modello prima delle analisi quantitative.
• Per WB, il peso molecolare atteso è di circa 41 kDa; includere controlli positivi e negativi appropriati (ad esempio lisati trattati con siRNA e con sovraespressione di PRKACA) per confermare la specificità della banda.
• Per IF/ICC, prendere in considerazione protocolli di fissazione/permeabilizzazione che preservino l'antigenicità; aspettarsi pattern di colorazione citoplasmatica e nucleare coerenti con la localizzazione riportata.
• Per ELISA, titolare l'anticorpo per ottenere un rapporto segnale/rumore ottimale e associarlo a un anticorpo secondario adatto; convalidare le prestazioni utilizzando proteina ricombinante o lisati cellulari.
• Lo stato di convalida KD indica che la specificità dell'anticorpo è stata confermata utilizzando approcci di knockdown mediati da siRNA o shRNA; prendere in considerazione l'inclusione di controlli di knockdown nei vostri saggi per verificare ulteriormente la dipendenza del segnale dall'espressione del bersaglio.

CamelBio: il tuo ponte di approvvigionamento one-stop

CamelBio fornisce a produttori di diagnostica e laboratori di ricerca un portafoglio completo di materie prime per IVD, inclusi anticorpi convalidati come questo anticorpo monoclonale anti-PKA C-alfa (PRKACA) per la ricerca sulla segnalazione del cAMP e sulle chinasi. Il nostro approvvigionamento one-stop colma il divario dal concetto alla clinica, offrendo coppie di anticorpi ottimizzate, reagenti ausiliari sfusi e approvvigionamento personalizzato di materie prime per bersagli rari per accelerare lo sviluppo del test e i flussi di lavoro di approvvigionamento.