Anticorpo policlonale di coniglio Anti-PKA C-alfa (PRKACA) per WB, IF/ICC, ELISA - P17612

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PKA C-alfa (PRKACA)

• PRKACA codifica per la subunità catalitica alfa della protein chinasi dipendente da cAMP (PKA), una delle principali Ser/Thr chinasi che trasduce i segnali del cAMP. L'isoforma 1 è espressa ubiquitariamente, mentre l'isoforma 2 è specifica dello sperma.

• La chinasi fosforila una vasta gamma di substrati citoplasmatici e nucleari, inclusi fattori di trascrizione (NFKB1, SOX9), canali ionici (RYR2), proteine di segnalazione (VASP, ABL1) e istoni (H1.4), regolando di conseguenza il ciclo cellulare, il metabolismo e l'espressione genica. Riferimenti correlati: PMID:15642694 PMID:15905176 PMID:16387847

• Nelle piastrine, PRKACA mantiene la quiescenza formando complessi inibitori con NF-kappa-B e I-kappa-B-alfa; la rottura indotta da trombina o collagene porta alla fosforilazione di VASP e all'aggregazione piastrinica. Riferimenti correlati: PMID:15642694 PMID:20356841

• PRKACA agisce come un regolatore negativo chiave della via di segnalazione di smoothened, fosforilando i fattori di trascrizione GLI (GLI1/2/3), promuovendone il processo proteolitico e l'inattivazione trascrizionale; questa inibizione viene annullata quando SMO sequestra PRKACA alla membrana plasmatica. Riferimenti correlati: PMID:16705181 PMID:36202993 PMID:39138140

• La proteina si localizza in diversi compartimenti subcellulari, tra cui citoplasma, nucleo, membrana cellulare, mitocondri e ciglia/flagello, a conferma delle sue diverse funzioni di segnalazione.

• Altre funzioni regolatorie includono la fosforilazione di HSF1 per promuovere la risposta da shock termico, la modulazione di mTORC1 tramite fosforilazione di RPTOR e la fosforilazione di AKAP19. Riferimenti correlati: PMID:21085490 PMID:31112131 PMID:27028580

• Le mutazioni di PRKACA associate a malattie sono collegate alla sindrome di Cushing, a conferma della sua importanza endocrina.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre quasi tutta la lunghezza della proteina PRKACA umana (amminoacidi 1-351), il che suggerisce un ampio riconoscimento degli epitopi. Per il Western blot, è prevista una banda principale a ~41 kDa. Verificare la specificità utilizzando lisati cellulari di knockdown o knockout di PRKACA.

• Questo anticorpo policlonale è adatto per immunofluorescenza/immunocitochimica; si consiglia di ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione per rilevare le diverse popolazioni subcellulari (citoplasmatica, nucleare, di membrana, mitocondriale).

• L'anticorpo presenta reattività crociata con PRKACA di topo e ratto, permettendo studi su modelli roditori. Validare la reattività specie-specifica nel proprio sistema di campioni prima dei saggi quantitativi.

• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; testare l'abbinamento con altri anticorpi anti-PRKACA per sviluppare un ELISA sandwich ad alta sensibilità.

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