Anticorpo monoclonale di coniglio anti-PKA C-alfa per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P17612

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della PKA C-alfa

• La PKA C-alfa, codificata da PRKACA, è la subunità catalitica alfa della proteina chinasi cAMP-dipendente. Esistono due isoforme: l'isoforma 1 è ubiquitariamente espressa, mentre l'isoforma 2 è specifica dello sperma ed è arricchita negli spermatociti pachitenici.
• Come serina/treonina chinasi, fosforila numerosi substrati nel citoplasma e nel nucleo, inclusi NFKB1 (PubMed:15642694), VASP (PubMed:15642694, PubMed:20356841), RYR2 (PubMed:17693412) e ABL1 (PubMed:15178447). Questi eventi regolano l'aggregazione piastrinica, la segnalazione del calcio e la capacitazione degli spermatozoi. Riferimenti correlati: PMID:15642694, PMID:20356841, PMID:17693412, PMID:15178447
• Si localizza in più compartimenti, incluso citoplasma, nucleo, membrana cellulare, mitocondri, ciglia e vescicole secretorie, riflettendo i suoi molteplici ruoli regolatori.
• Nella via di segnalazione hedgehog, la PKA C-alfa agisce come un inibitore chiave fosforilando i fattori di trascrizione GLI (PubMed:16705181). Questa fosforilazione promuove il processamento di GLI e previene l'attivazione dei geni target, un processo antagonizzato dal sequestro mediato da SMO (PubMed:36202993, PubMed:39138140). Riferimenti correlati: PMID:16705181, PMID:36202993, PMID:39138140
• La proteina è miristoilata e contiene domini di legame nucleotidico e chinasi, classificandola come una lipoproteina e transferasi. Varianti associate a malattie sono collegate alla sindrome di Cushing.
• Fosforila anche CDC25B per prevenire la ripresa della meiosi negli ovociti arrestati in profase (Per similarità) e regola le giunzioni strette tramite la fosforilazione di CLDN3 (PubMed:15905176). Riferimenti correlati: PMID:15905176

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 1-351 della PKA C-alfa umana) copre quasi l'intera proteina, suggerendo il riconoscimento di entrambe le isoforme. Considerare la validazione della specificità dell'isoforma utilizzando campioni isoforma-specifici (es. cellule spermatiche per l'isoforma 2).
• Per il Western blot, il peso molecolare atteso è di circa 40–41 kDa. Utilizzare controlli positivi appropriati (es. lisati HeLa, Jurkat) e validare nel tessuto target.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, è attesa una colorazione nucleare e citoplasmatica; verificare la localizzazione subcellulare nelle proprie condizioni sperimentali.
• Per l'ELISA, abbinare a un anticorpo di cattura adeguato e confermare le prestazioni con PKA C-alfa ricombinante o campioni biologici rilevanti.

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