Anticorpo monoclonale di coniglio anti-PKC alfa per WB/ELISA - P17252

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della protein chinasi C alfa

• La PKC alfa è una chinasi serina/treonina che svolge ruoli fondamentali nella proliferazione, differenziazione, apoptosi, migrazione e adesione cellulare fosforilando bersagli come RAF1, BCL2 e CSPG4 oppure modulando le cascate di segnalazione MAPK/ERK e RAP1GAP.
• Presenta funzioni sia promotrici sia soppressive dei tumori a seconda del contesto; nei gliomi e nei tumori della mammella promuove la crescita cellulare, mentre in determinati tipi cellulari può indurre l'arresto del ciclo cellulare attraverso RB1 e CDKN1A/B.
• La localizzazione subcellulare è dinamica: la PKC alfa risiede nel citoplasma, ma in seguito all'attivazione trasloca sulla membrana cellulare, sulla membrana mitocondriale o nel nucleo, consentendo una segnalazione specifica del contesto.
• Nelle cellule immunitarie, regola la migrazione delle cellule T CD4+ fosforilando DOCK8, con conseguente attivazione di CDC42. Riferimenti correlati: PMID:28028151
• Nel sistema cardiovascolare, la PKC alfa regola negativamente la contrattilità miocardica, media l'ipertrofia dei cardiomiociti attraverso ERK1/2 e promuove l'angiogenesi stabilizzando l'mRNA di VEGFA e aumentando la migrazione delle cellule endoteliali.
• Fosforila KLHL3 per regolare il trasporto ionico in risposta all'angiotensina II. Riferimenti correlati: PMID:25313067
• Fosforila e attiva LRRK1 per controllare il traffico intracellulare. Riferimenti correlati: PMID:36040231
• Le caratteristiche strutturali principali includono i domini C2 e C1, responsabili del legame con il calcio e il DAG, e un dominio chinasico con un sito di legame per l'ATP; modifiche post-traduzionali come la fosforilazione e l'acetilazione ne regolano l'attività.
• Classificata come proto-oncogene, la PKC alfa è una fosfoproteina a dita di zinco che integra i segnali provenienti da fattori di crescita, ormoni e neurotrasmettitori.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, si prevede una banda a circa 77 kDa; validare utilizzando controlli positivi appropriati, come lisati cellulari HeLa e A431, e marcatori di peso molecolare.
• Questo anticorpo è adatto per l'ELISA; si raccomanda di ottimizzare le concentrazioni dell'anticorpo mediante titolazione con un antigene positivo noto.
• L'anticorpo presenta reattività crociata con la PKC alfa umana, murina e di ratto, rendendolo ampiamente applicabile agli studi su queste specie.
• Spedito in borse di ghiaccio; al ricevimento, conservare a -20 °C per la stabilità a lungo termine. Evitare cicli ripetuti di congelamento e scongelamento.
• Considerare l'utilizzo di tamponi di blocco standard, come latte scremato in polvere al 5%, e verificare la specificità con controlli negativi appropriati e, se necessario, mediante knockdown con siRNA.

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