Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-PKC alfa per WB, ELISA - P17252

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PKC alfa

• PKC alfa (protein kinase C tipo alfa) è una serina/treonina-proteina chinasi attivata dal calcio, dipendente da fosfolipidi e diacilglicerolo, appartenente alla famiglia PKC. Regola vari processi cellulari tra cui proliferazione, apoptosi, differenziazione, migrazione e adesione.
• Svolge un duplice ruolo nel controllo del ciclo cellulare: promuove la proliferazione tramite attivazione di RAF1/MAPK/ERK e upregolazione di CDKN1A, e può anche innescare l'arresto del ciclo cellulare con iperfosforilazione di RB1 e induzione di inibitori delle CDK in seguito a stimolazione con PMA.
• Esibisce funzioni anti-apoptotiche nel cancro: sopprime l'attivazione di IGFBP3 mediata da TP53 nelle cellule di glioma e fosforila BCL2 nelle cellule leucemiche. Altamente espresso in vari tumori, agendo come promotore tumorale.
• Localizza subcellularmente nel citoplasma, membrana cellulare, membrana mitocondriale e nucleo. Si trasloca alle lamellipodia dopo una ferita, modulando l'adesione desmosomiale e la motilità cellulare.
• Durante la migrazione dei linfociti T CD4+ indotta da chemochine, fosforila DOCK8, portando all'attivazione di CDC42 (PubMed:28028151). Riferimenti correlati: PMID:28028151
• Nei cardiomiociti, media la crescita ipertrofica tramite la via MAPK1/3 e fosforila TNNT2, riducendo la contrattilità miocardica. Essenziale per l'angiogenesi, la migrazione endoteliale e la segnalazione di VEGFA.
• Fosforila KLHL3 in risposta all'angiotensina II, interrompendo l'interazione KLHL3-WNK4 (PubMed:25313067); fosforila LRRK1 per regolare il traffico intracellulare mediato da RAB (PubMed:36040231). Riferimenti correlati: PMID:25313067 PMID:36040231
• Funziona nell'aggregazione piastrinica tramite segnali CD36/GP4 e attivazione dell'integrina, e modula le risposte infiammatorie dei macrofagi al LPS, a volte regolando negativamente NF-kappa-B.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico della regione C-terminale (amminoacidi 573–672) della PKC alfa umana, che può offrire specificità per l'isoforma; la reattività crociata con altre isoforme PKC dovrebbe essere valutata nei sistemi di saggio rilevanti.
• Per il Western blot, è attesa una banda a circa 77 kDa; convalidare utilizzando controlli positivi appropriati (ad es., lisati di linee cellulari umane, di topo o di ratto note per esprimere PKC alfa).
• Per l'ELISA, ottimizzare le condizioni di coating e la titolazione dell'anticorpo per ottenere la sensibilità desiderata; considerare l'uso della proteina PKC alfa ricombinante come standard.
• La pre-adsorbimento con il peptide immunizzante può servire come utile controllo negativo per confermare la specificità della banda nel WB.

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