Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-PKC alfa per WB, IHC-P, ELISA - P17252

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della PKC alfa

• La protein chinasi C alfa (PKCα) è una serina/treonina-proteina chinasi attivata dal calcio, fosfolipide- e diacilglicerolo (DAG)-dipendente, codificata dal gene PRKCA. Appartiene alla famiglia delle PKC e contiene caratteristici domini a dita di zinco e un sito di legame per l'ATP.
• PKCα svolge un ruolo centrale nella proliferazione, differenziazione, apoptosi, migrazione e adesione cellulare. Promuove la crescita cellulare tramite la segnalazione MAPK/ERK mediata da RAF1 e può anche indurre l'arresto del ciclo cellulare regolando positivamente gli inibitori delle CDK CDKN1A e CDKN1B.
• Esibisce attività anti-apoptotica nelle cellule tumorali; ad esempio, fosforila BCL2 per bloccare l'apoptosi e sopprime l'attivazione mediata da p53/TP53 di IGFBP3 nelle cellule di glioma.
• Altamente espressa in molti tumori e funge da promotore tumorale, contribuendo ai fenotipi maligni nei gliomi e nei carcinomi mammari.
• Nel sistema cardiovascolare, regola negativamente la contrattilità miocardica attraverso la fosforilazione della troponina T cardiaca (TNNT2/CTNT) e media l'ipertrofia dei cardiomiociti tramite la segnalazione MAPK1/3 (ERK1/2).
• Coinvolta nell'angiogenesi, nell'aggregazione piastrinica e nell'infiammazione. Regola la migrazione delle cellule endoteliali e la segnalazione VEGFA e modula le risposte macrofagiche indotte da LPS.
• La localizzazione subcellulare include citoplasma, membrana cellulare, membrana mitocondriale e nucleo. Si verifica una traslocazione dipendente dallo stimolo, come il movimento verso i lamellipodi in seguito a ferita o verso il nucleo durante la differenziazione dei macrofagi.
• Ulteriori bersagli di fosforilazione includono DOCK8 (regola la migrazione delle cellule T attraverso l'attivazione di CDC42), KLHL3 (modula l'interazione con WNK4 in risposta all'angiotensina II) e LRRK1 (controlla il traffico delle proteine RAB). Riferimenti correlati: PMID:28028151 PMID:25313067 PMID:36040231

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione C-terminale (aa 573–672) della PKC alfa umana. Questa sequenza è altamente conservata tra umano, topo e ratto, supportando la reattività crociata osservata.
• Per il Western blotting, considerare diluizioni iniziali tra 1:500 e 1:2000 e validare su lisati di linee cellulari o tessuti noti per esprimere PKCα (es. cervello, cuore, linee cellulari tumorali).
• Nell'IHC-P, potrebbe essere necessario un recupero dell'antigene; ottimizzare le condizioni di fissazione e recupero per il tipo di campione. Includere controlli positivi e negativi appropriati.
• Essendo un anticorpo policlonale, le prestazioni possono variare da lotto a lotto; è consigliabile titolare ogni nuovo lotto e confermare la specificità nel sistema modello rilevante.

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