Anticorpo monoclonale di coniglio anti-PKC-beta per WB, IHC-P, ELISA - P05771

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Protein chinasi C beta

• La protein chinasi C beta (PKC-beta, gene PRKCB) è una serina/treonina-protein chinasi attivata dal calcio e dipendente da fosfolipidi e diacilglicerolo, appartenente alla famiglia delle protein chinasi C. Contiene domini regolatori C1 e C2 e un dominio catalitico chinasico, ed è espressa in molteplici isoforme tramite splicing alternativo.
• PKC-beta gioca un ruolo fondamentale nella segnalazione del recettore delle cellule B (BCR) mediando l'attivazione di NF-kappa-B. Fosforila direttamente CARD11/CARMA1, portando al reclutamento del complesso BCL10-MALT1 e all'attivazione del complesso IKK, promuovendo infine la translocazione nucleare di NFKB1 (PubMed:11598012). Riferimenti correlati: PMID:11598012
• In risposta a stress ossidativo, PKC-beta fosforila specificamente p66Shc, innescando l'accumulo mitocondriale e la produzione di specie reattive dell'ossigeno, promuovendo così l'apoptosi. Agisce anche come attivatore della ferroptosi fosforilando ACSL4 (PubMed:35027735) e FOXK1 (PubMed:40246981). Riferimenti correlati: PMID:35027735 PMID:40246981
• PKC-beta funge da co-attivatore trascrizionale fosforilando l'istone H3 in Thr-6 (H3T6ph), una modifica che previene la demetilazione di H3K4 mediata da LSD1 e mantiene uno stato cromatinico attivo nei geni bersaglio del recettore degli androgeni (PubMed:20228790). Fosforila anche ATF2, potenziando l'attività trascrizionale di AP-1 (PubMed:19176525). Riferimenti correlati: PMID:20228790 PMID:19176525
• Nella regolazione metabolica, PKC-beta partecipa alla segnalazione dell'insulina e all'omeostasi del glucosio. Fosforila SLC2A1/GLUT1 per promuovere l'assorbimento del glucosio (PubMed:25982116) e regola negativamente la translocazione di SLC2A4/GLUT4 stimolata dall'insulina negli adipociti. Inoltre, fosforila KLHL3, influenzando la segnalazione di WNK4 (PubMed:25313067). Riferimenti correlati: PMID:25982116 PMID:25313067
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma, il nucleo e la membrana, in linea con i suoi ruoli nella trasduzione del segnale dai recettori di membrana alla trascrizione nucleare. La proteina è soggetta ad autofosforilazione e acetilazione, che ne modulano l'attività e le interazioni.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 260-340 della PKC-beta umana, una regione all'interno del dominio catalitico. Questo design può conferire specificità per la forma chinasica attiva; considerare di verificare la specificità dell'isoforma tramite allineamento di sequenze se necessario.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda a circa 77 kDa. Utilizzare controlli di caricamento appropriati e validare la diluizione dell'anticorpo nel proprio tipo di campione.
• Per IHC-P, potrebbero essere necessarie condizioni di recupero dell'antigene (buffer citrato o EDTA); si raccomanda un'ottimizzazione preliminare su sezioni di tessuto in paraffina.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di rilevamento; è necessario l'abbinamento con un anticorpo di cattura e un antigene di rivestimento adeguati.
• L'anticorpo reagisce in modo crociato con la PKC-beta di topo e ratto, consentendo studi in modelli roditori. Tuttavia, confermare la reattività nel proprio tessuto o linea cellulare specifica per escludere differenze specie-specifiche.

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