Anticorpo policlonale di coniglio anti-PKC epsilon per WB, IHC-P, ELISA - Q02156

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PKC epsilon

• La protein chinasi C di tipo epsilon (PKC epsilon, nota anche come nPKC-epsilon) è una serina/treonina-protein chinasi indipendente dal calcio e dipendente dai fosfolipidi e dal diacilglicerolo (DAG), codificata nell'uomo dal gene PRKCE. Appartiene alla famiglia delle protein chinasi C e contiene un dominio di tipo dito di zinco per esteri del forbolo/DAG.
• PKC epsilon svolge ruoli chiave nella regolazione delle dinamiche del citoscheletro, tra cui adesione cellulare, motilità, migrazione e progressione del ciclo cellulare. Media la segnalazione dipendente dalle integrine e fosforila substrati quali MARCKS e vimentina per controllare la diffusione cellulare e il trasporto direzionale.
• Questa chinasi è coinvolta nella crescita neuronale, nella plasticità sinaptica e nella regolazione dei canali ionici, contribuendo alla crescita dei neuriti e alla facilitazione presinaptica. Modula inoltre la segnalazione del dolore fosforilando TRPV1.
• PKC epsilon partecipa alle risposte immunitarie fosforilando TICAM2/TRAM a valle di TLR4, portando all'attivazione di IRF3 e alla produzione di citochine. Contribuisce inoltre all'invasione delle cellule tumorali attraverso la fosforilazione di STAT3.
• Nelle cellule cardiache, PKC epsilon regola la funzione dei miofilamenti e l'accoppiamento eccitazione-contrazione; la sua fosforilazione persistente della troponina I è implicata nella cardiomiopatia dilatativa. Svolge inoltre un ruolo nell'ipertrofia dei cardiomiociti.
• PKC epsilon si localizza nel citoplasma, nel citoscheletro, nella membrana cellulare, nella regione perinucleare e nel nucleo, consentendo una regolazione spaziale dinamica delle sue attività di segnalazione.
• Tra le funzioni aggiuntive figurano la regolazione dell'apoptosi nei progenitori eritroidi, la modulazione dell'attivazione di AKT1 indotta dall'insulina e la fosforilazione di NLRP5/MATER, che modula la via di AKT nelle cellule del cumulo. Riferimenti correlati: PMID:19542546
• PKC epsilon fosforila e attiva anche LRRK1, che a sua volta fosforila le proteine RAB coinvolte nel trasporto intracellulare. Riferimenti correlati: PMID:36040231
• A livello proteico, PKC epsilon è espressa nelle cellule del cumulo; sulla base degli studi funzionali, è probabile una più ampia espressione in vari tessuti.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio catalitico C-terminale (aa 488-737), altamente conservato tra PKC epsilon umana, murina e di ratto, a sostegno della reattività crociata riportata.
• Per il Western blot (WB), la banda attesa è intorno a 84 kDa. Si consiglia di utilizzare lisati cellulari totali ottenuti da cellule stimolate (ad esempio, trattate con PMA) per migliorare la rilevazione.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), possono essere necessarie adeguate fasi di recupero antigenico e permeabilizzazione a causa della localizzazione della chinasi in più compartimenti.
• Le prestazioni dell'ELISA possono dipendere dall'antigene di rivestimento e dal formato di rilevazione; validare utilizzando proteine ricombinanti o standard peptidici.
• Quando si studia l'attivazione di PKC epsilon, è consigliabile valutare il suo stato di fosforilazione o la traslocazione come indicatori di attivazione, poiché l'anticorpo può riconoscere sia le forme non fosforilate sia quelle fosforilate.

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