Anticorpo Policlonale Anti-PKC zeta per WB, IF/ICC, ELISA - Q05513

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PKC zeta

• PKC zeta (nPKC-zeta) è una protein chinasi C atipica, insensibile al calcio e al diacilglicerolo, e funziona come una serina/treonina-protein chinasi nell'attivazione di NF-kappa-B, nella segnalazione mitogenica, nella proliferazione cellulare, nella polarità cellulare, nella risposta infiammatoria e nel mantenimento della potenziazione a lungo termine (LTP).
• A valle di PI3K, PKC zeta attiva la cascata MEK1-ERK2 indipendentemente da RAF1 nei macrofagi e in seguito a stimoli mitogenici. Contribuisce anche all'attivazione di AKT3 dipendente dall'insulina e alla traslocazione di GLUT4 negli adipociti, agendo in parte come un adattatore.
• PKC zeta media l'attivazione di NF-kappa-B attraverso interazioni con SQSTM1/p62, RIPK1 e TRAF6, portando alla fosforilazione di IKBKB e alla degradazione dell'inibitore di NF-kappa-B. Inoltre, fosforila RELA in Ser-311 per contrastare la repressione mediata da SETD6.
• Nella polarità cellulare, PKC zeta forma un complesso citoplasmatico con PARD6A ed è reclutata da CDC42 per stabilire la polarità con i motori microtubulari. Stimola la differenziazione neuronale con FEZ1 ed è necessaria per la fase tardiva della LTP nelle sinapsi CA1 dell'ippocampo, cruciale per la memoria a lungo termine.
• PKC zeta fosforila VAMP2 in vitro e attiva LRRK1, che a sua volta fosforila le proteine RAB coinvolte nel traffico intracellulare. Riferimenti correlati: PMID:17313651 PMID:36040231
• PKC zeta si localizza nel citoplasma, negli endosomi, nelle giunzioni cellulari e nella membrana. È espressa prevalentemente nel cervello, con livelli inferiori in polmone, rene e testicolo. Contiene un dominio zinc-finger e un sito di legame per l'ATP, ed è soggetta a splicing alternativo e fosforilazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (amminoacidi 476–547), che può garantire una buona accessibilità dell'epitopo per il rilevamento della proteina nativa e denaturata.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è ~68 kDa; includere sempre controlli positivi e negativi per confermare la specificità.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione, poiché PKC zeta può localizzarsi in più compartimenti (citoplasma, membrana, endosomi, giunzioni).
• L'ELISA può essere utilizzato per il rilevamento quantitativo di PKC zeta in lisati cellulari o proteina purificata; validare con standard noti.
• È attesa una reattività crociata con topo e ratto; confermare la reattività nel proprio sistema di campioni specifico prima di studi su larga scala.

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