Anticorpo Monoclonale Anti-PKM1/2 Rabbit PolymAb® per WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P14618

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PKM1/2

• PKM1/2, codificato dal gene PKM, è una piruvato chinasi che catalizza il passaggio limitante finale della glicolisi, trasferendo un gruppo fosforile dal fosfoenolpiruvato (PEP) all'ADP per generare ATP. Riferimenti correlati: PMID:15996096, PMID:1854723, PMID:20847263
• Il gene PKM produce due isoforme principali attraverso splicing alternativo: PKM2, associata all'embrione e ai tumori, e PKM1, specifica dei tessuti adulti, che differiscono nella regolazione e nell'attività. Riferimenti correlati: PMID:18337823, PMID:20847263
• L'attività di PKM2 è controllata da uno switch allosterico tra un tetramero altamente attivo e un dimero quasi inattivo; questo spostamento determina se il glucosio viene utilizzato per la produzione di ATP o deviato verso vie biosintetiche, un processo critico per la proliferazione e sopravvivenza delle cellule tumorali. Riferimenti correlati: PMID:15996096, PMID:1854723, PMID:20847263
• Oltre al suo ruolo metabolico citoplasmatico, PKM2 si trasloca nel nucleo dove agisce come una proteina chinasi, fosforilando bersagli come STAT3 (Tyr-705) e l'istone H3 (Thr-11) per modulare la trascrizione, incluso promuovere l'espressione di VEGFA nell'angiogenesi. Riferimenti correlati: PMID:18191611, PMID:21620138, PMID:22056988, PMID:22306293, PMID:22901803, PMID:24120661
• PKM2 è espressa specificamente in cellule proliferanti come le cellule staminali embrionali e le cellule tumorali, mentre PKM1 si trova prevalentemente nei tessuti adulti normali. Riferimenti correlati: PMID:18337823
• La proteina si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo, in linea con i suoi duplici ruoli nel metabolismo e nella regolazione trascrizionale.
• La proteina PKM2 subisce estese modificazioni post-traduzionali—inclusa acetilazione, metilazione, fosforilazione e idrossilazione—che ne regolano l'attività enzimatica, la localizzazione e le funzioni non metaboliche.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per applicazioni di Western blot e immunoistochimica, utilizzare lisati cellulari o tissutali di origine umana, murina o di ratto, poiché l'anticorpo mostra un'ampia reattività crociata.
• Data la duplice localizzazione citoplasmatica e nucleare di PKM1/2, considerare protocolli appropriati di frazionamento o co-colorazione negli esperimenti IF/ICC per confermare la distribuzione subcellulare.
• Quando si valutano le funzioni specifiche di PKM2, convalidare la specificità del rilevamento utilizzando linee cellulari carenti di PKM2 o knockdown mediato da siRNA, poiché l'immunogeno copre una regione conservata tra le isoforme.
• Ottimizzare le diluizioni dell'anticorpo per ogni applicazione attraverso una serie di diluizioni, poiché le concentrazioni di lavoro ottimali possono variare tra i tipi di campione e i sistemi di rilevamento.

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