Anticorpo Monoclonale Anti-PKR/EIF2AK2 per WB, IF/ICC, ELISA - P19525

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PKR/EIF2AK2

• PKR/EIF2AK2 è una serina/treonina-proteina chinasi dipendente da RNA a doppio filamento indotta da interferone che mostra anche attività tirosina-proteina chinasi, svolgendo un ruolo fondamentale nella risposta immunitaria innata contro le infezioni virali (PubMed:18835251, PubMed:19189853, PubMed:19507191). Riferimenti correlati: PMID:18835251 PMID:19189853 PMID:19507191
• Fosforila la subunità α del fattore di inizio della traduzione eucariotica 2 (EIF2S1/eIF-2α) dopo attivazione da dsRNA virale, portando all'inibizione globale della sintesi proteica e alla traduzione preferenziale di mRNA della risposta allo stress come ATF4, sopprimendo così la replicazione virale (PubMed:19189853, PubMed:21123651, PubMed:22948139). Riferimenti correlati: PMID:19189853 PMID:21123651 PMID:22948139
• Mostra attività antivirale contro un ampio spettro di virus a DNA e RNA, incluso il virus dell'epatite C (HCV), il virus dell'epatite B (HBV), il virus del morbillo (MV) e il virus dell'herpes simplex 1 (HHV-1) (PubMed:11836380, PubMed:19189853, PubMed:19840259). Riferimenti correlati: PMID:11836380 PMID:19189853 PMID:19840259
• Oltre al controllo della traduzione, PKR modula diverse vie di segnalazione (p38 MAP chinasi, NF-κB, segnalazione dell'insulina) e fattori di trascrizione (JUN, STAT1, IRF1) per regolare l'espressione di citochine pro-infiammatorie e geni dell'interferone (PubMed:22948139, PubMed:23084476, PubMed:23372823). Riferimenti correlati: PMID:22948139 PMID:23084476 PMID:23372823
• La localizzazione subcellulare include citoplasma, nucleo e regione perinucleare, con elevata espressione tessuto-specifica nel timo, nella milza e nel midollo osseo; livelli elevati si osservano nei carcinomi della mammella e del colon, correlati con la progressione tumorale.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione (legame isopeptidico), che contribuiscono alla sua regolazione sotto stress e stimoli immunitari.
• Contiene domini di legame all'RNA e motivi chinasi, classificandolo come una transferasi legante ATP con attività chinasi duale serina/treonina e tirosina, essenziale per la difesa antivirale e la dinamica dei granuli di stress.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide sintetico degli amminoacidi 450-551, una regione all'interno del dominio chinasi; considerare ciò quando si valuta la specificità dell'epitopo e il potenziale riconoscimento degli isoformi.
• Questo anticorpo è validato per Western blotting (WB), immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC) ed ELISA; le diluizioni di lavoro ottimali devono essere determinate empiricamente per ogni applicazione e tipo di campione.
• Poiché PKR è una proteina indotta da interferone, il pre-trattamento delle cellule con interferone di tipo I o mimetici di infezione virale può migliorare il rilevamento in alcuni modelli sperimentali.
• Il peso molecolare previsto di PKR è 62 kDa, ma le modifiche post-traduzionali (es. fosforilazione) possono causare lievi spostamenti; includere controlli positivi appropriati (es. lisati di HeLa o A549 trattati con interferone).
• La reattività incrociata è confermata per campioni umani; per altre specie, si raccomanda l'allineamento delle sequenze prima dell'uso, poiché la reattività incrociata non è garantita.

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