Anticorpo monoclonale di coniglio anti-PLC gamma 1 (PLCG1) per WB, ELISA - P19174

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PLCG1

• PLCG1 codifica per la fosfolipasi C gamma-1, un enzima chiave che idrolizza il fosfatidilinositolo 4,5-bisfosfato (PIP2) per generare i secondi messaggeri diacilglicerolo (DAG) e inositolo 1,4,5-trisfosfato (IP3), regolando così il segnale intracellulare del calcio e della proteina chinasi C.
• La proteina è attivata a valle dei recettori tirosin-chinasici (es. PDGFRA, PDGFRB, EGFR, FGFRs) e svolge un ruolo critico nella trasduzione del segnale mediata dai fattori di crescita, collegando i recettori di superficie cellulare alle cascate a valle.
• PLCG1 partecipa alla riorganizzazione del citoscheletro di actina e alla migrazione cellulare, e si localizza in strutture cellulari dinamiche come lamellipodi e membrane ondulate. Riferimenti correlati: PMID:17229814
• Oltre alla sua attività lipasica, PLCG1 funge da fattore di scambio di nucleotidi della guanina (GEF) per la dinamina-1 (DNM1), facilitando la dissociazione del GDP e potenziando l'endocitosi dipendente da DNM1.
• La proteina contiene domini regolatori SH2 e SH3 che mediano le interazioni con proteine contenenti fosfotirosina e motivi ricchi di prolina, contribuendo al suo assemblaggio in complessi di segnalazione.
• Modificazioni post-traduzionali come fosforilazione (su residui di tirosina e serina) e acetilazione ne modulano l'attività e le interazioni; lo splicing alternativo genera multiple isoforme.
• PLCG1 è espressa in modo ubiquitario ed è implicata in vari contesti patologici, inclusi tumori e disturbi genetici, dove una segnalazione aberrante attraverso questa via guida processi patologici.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione tra gli amminoacidi 710–832 di PLCG1 umano, che si trova all'interno del dominio catalitico; questa regione è altamente conservata tra uomo, topo e ratto, supportando la reattività crociata osservata.
• Per il Western blot, considerare l'uso di lisati cellulari totali da linee cellulari umane comunemente utilizzate (es. HeLa, Jurkat, A431), dove PLCG1 è espressa a livelli moderati in modo endogeno; ci si aspetta una banda di circa 149 kDa.
• Durante lo sviluppo di un saggio ELISA, validare l'anticorpo sia in formati diretti che di cattura utilizzando proteina ricombinante o target nativo; notare che la reattività dell'anticorpo può essere influenzata dalla conformazione proteica e dalla preparazione del campione.
• Ottimizzare le condizioni di blocco e lavaggio per minimizzare il fondo, poiché l'anticorpo è monoclonale di coniglio; si raccomanda di eseguire esperimenti di titolazione per ogni nuova applicazione.

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