Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-PLD4 per WB, ELISA - Q96BZ4

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PLD4

• PLD4 (Membro 4 della famiglia della Fosfolipasi D) è un'esonucleasi lisosomiale 5'->3' che idrolizza RNA e DNA a singolo filamento, con maggiore efficienza per i residui di uridina e guanosina in 5'. Può produrre nucleosidi 3'-monofosfati e frammenti 5'-idrossilici, svolgendo un ruolo chiave nel rilevamento degli acidi nucleici da parte delle cellule immunitarie. Riferimenti correlati: PMID:30111894, PMID:34620855, PMID:38537643

• Attraverso l'elaborazione di RNA e DNA, PLD4 fornisce segnali molecolari ai recettori Toll-like (TLR). Collabora con RNase T2/RNASET2 per generare 2',3'-cGMP e frammenti di RNA ricchi di citidina che attivano TLR7, evidenziandone l'importanza nell'immunità innata. Riferimenti correlati: PMID:38697119

• Oltre all'attività esonucleasica, PLD4 può catalizzare la transfosfatidilazione tra lisofosfatidilglicerolo e monoacilglicerolo per produrre (S,S)-bis(monoacilglicero)fosfati (BMP), essenziali per la formazione delle vescicole intraluminali lisosomiali e la degradazione dei lipidi.

• La proteina è localizzata in più compartimenti intracellulari tra cui il lisosoma, la membrana del reticolo endoplasmatico, l'apparato di Golgi, gli endosomi precoci, i fagosomi e il nucleo, riflettendo i suoi ruoli dinamici nell'elaborazione immunitaria.

• PLD4 è espressa prevalentemente a livello proteico nelle cellule dendritiche plasmocitoidi e nei monociti, in linea con la sua funzione nel rilevamento immunitario innato.

• PLD4 contiene un'ancora di segnale, un'elica transmembrana e legami disolfuro, ed è prevista essere una proteina transmembrana glicosilata.

• Le mutazioni in PLD4 sono associate al lupus eritematoso sistemico, collegando le sue funzioni di elaborazione degli acidi nucleici alle malattie autoimmuni.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 52-200 di PLD4 umano, che include la regione N-terminale che comprende il primo dominio transmembrana e parte del dominio esonucleasico; questo design può favorire il riconoscimento delle forme proteiche native e parzialmente denaturate.
• Per il WB, considerare un intervallo di diluizione da 1:500 a 1:2000 e validare in linee cellulari che esprimono PLD4 (es. cellule dendritiche umane o linee monocitiche) insieme a lisati tissutali di ratto per confermare la reattività crociata.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere esplorato in formati diretti o indiretti, con ottimizzazione dell'antigene di rivestimento e delle condizioni di rilevamento per ogni matrice campione.
• Il legame aspecifico può essere ridotto utilizzando tamponi di bloccaggio appropriati; a causa della localizzazione multi-compartimentale, può essere considerata la frazionamento subcellulare per arricchire il bersaglio.

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