Anticorpo policlonale anti-PLEKHB2 per WB, IHC-P, ELISA - Q96CS7

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PLEKHB2

• PLEKHB2 (membro della famiglia B2 contenente il dominio di omologia pleckstrin), noto anche come evectin-2, è codificato dal gene PLEKHB2 (GeneID: 55041).
• È unembro della famiglia di proteine contenenti il dominio di omologia pleckstrin, caratterizzato da un dominio PH che media il targeting di membrana.
• La funzione primaria di PLEKHB2 risiede nel trasporto retrogrado degli endosomi di riciclo, facilitando il movimento del carico dagli endosomi alla rete del Golgi trans.
• A livello subcellulare, PLEKHB2 si localizza sulla membrana degli endosomi di riciclo, dove partecipa ai processi di traffico di membrana.
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme, che possono presentare un'espressione tissutale distinta o ruoli funzionali diversi (UniProt: Q96CS7).
• Le parole chiave associate a PLEKHB2 includono struttura 3D (indicante la caratterizzazione strutturale), endosoma, membrana e proteoma di riferimento, sottolineando il suo ruolo nei compartimenti endosomiali.
• Il peso molecolare dell'isoforma canonica è di circa 24,7 kDa (UniProt), coerente con la banda osservata di ~25 kDa in ambiente sperimentale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato era una proteina di fusione ricombinante corrispondente agli amminoacidi 1-222 di PLEKHB2 umano (NP_001094093.1). Questa regione N-terminale include il dominio PH, pertanto l'anticorpo potrebbe riconoscere più isoforme che condividono questo dominio; verificare la specificità nel sistema campione pertinente.
• Per il Western blot (WB) in condizioni riducenti, è prevista una banda a ~25 kDa; si consiglia di utilizzare lisati di controllo positivo (es. HeLa o HEK293) e di confrontare con campioni di knockdown mediante siRNA/shRNA per confermare la specificità del segnale.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), i metodi di recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo richiedono un'ottimizzazione empirica; includere controlli di isotipo per valutare la colorazione di fondo.
• Per l'ELISA, utilizzare la proteina ricombinante purificata come standard; la reattività crociata con altre proteine contenenti il dominio PH dovrebbe essere valutata in caso di multiplexing.
• Conservare l'anticorpo come raccomandato (spedizione in borsa del ghiaccio, quindi a -20°C a -80°C all'arrivo) per mantenere la stabilità; evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento.

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