Anticorpo monoclonale di coniglio anti-PLOD2/LH2 per WB, ELISA - O00469

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PLOD2/LH2

• PLOD2 codifica per la procollageno-lisina,2-ossoglutarato 5-diossigenasi 2 (lisil idrossilasi 2, LH2), un membro della famiglia delle lisil idrossilasi che modifica i residui di lisina del collagene.
• LH2 catalizza l'idrossilazione dei residui di lisina nelle sequenze -Xaa-Lys-Gly- all'interno del collagene, formando idrossilisina; queste idrossilisine fungono da siti di attacco per i carboidrati e sono fondamentali per la stabilità dei cross-link intermolecolari del collagene.
• L'enzima è localizzato sulla membrana del reticolo endoplasmatico rugoso e nel citoplasma, dove avviene la modifica co-traduzionale del collagene.
• L'espressione tissutale è massima nel pancreas e nel muscolo; gli isoformi 1 e 2 sono ampiamente espressi, con l'isoforma 2 rilevata specificamente in pelle, polmone, dura madre e aorta.
• Varianti trascrizionali multiple codificano per isoforme diverse; le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione, fosforilazione e legame del ferro/metallo, con l'ascorbato (vitamina C) richiesto come cofattore.
• PLOD2 è associato a varianti di malattia legate all'osteogenesi imperfetta, e la proteina funge da componente del proteoma di riferimento nell'identificazione proteomica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 260–380 di PLOD2/LH2 umano (NP_000926.2); confermare che la regione epitopica sia presente nell'isoforma e nella specie target.
• Per il western blot (WB), si consiglia l'uso di un buffer di caricamento riducente e di un gel SDS-PAGE al 6–8% per risolvere la proteina di ~85 kDa; considerare di ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo tra 0,1–1 μg/mL.
• Nelle applicazioni ELISA, possono essere utilizzati formati indiretti o di cattura; convalidare l'idoneità della coppia di anticorpi per saggi sandwich se si sviluppano test quantitativi.
• È stata riportata reattività crociata con umano e ratto; la reattività con specie aggiuntive dovrebbe essere verificata mediante allineamento di sequenze della regione immunogenica.
• Eseguire controlli appropriati inclusi linee cellulari produttrici di collagene (es. fibroblasti, osteoblasti) e controlli negativi (es. lisati con knockdown o knockout di PLOD2).

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