Anticorpo monoclonale Anti-PLOD3/LH3 per WB, ELISA - O60568

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di PLOD3/LH3

• PLOD3 (conosciuto anche come LH3) è un enzima multifunzionale che catalizza le modificazioni post-traduzionali dei residui di lisina nel procollagene, tra cui idrossilazione, galattosilazione e glucosilazione, processi critici per la stabilità del collagene e l'integrità della membrana basale. Riferimenti correlati: PMID:11956192 PMID:12475640 PMID:18298658
• Catalizza in modo ridondante la formazione di idrossilisina nei motivi -Xaa-Lys-Gly- dei collagene. Riferimenti correlati: PMID:11956192 PMID:12475640 PMID:18298658
• PLOD3 trasferisce anche il galattosio sui residui di idrossilisina, formando galattosil idrossilisina. Riferimenti correlati: PMID:12475640 PMID:18298658 PMID:18834968
• Il suo ruolo essenziale risiede nella successiva attività glucosiltransferasi, che produce residui di 1,2-glucosilgalattosil-5-idrossilisina. Riferimenti correlati: PMID:10934207 PMID:11896059 PMID:11956192
• PLOD3 è necessario per la biosintesi e la secrezione normali dei collageni di tipo IV e per la formazione della membrana basale. Riferimenti correlati: PMID:18834968
• Si localizza principalmente nel reticolo endoplasmatico ruvido, nel lume del RE e nella membrana del RE, e può essere secreta nello spazio extracellulare.
• La proteina è espressa ubiquitariamente, con livelli relativamente più alti nel cuore, placenta e pancreas, e più bassi nel polmone, fegato e muscolo scheletrico. Riferimenti correlati: PMID:9724729 PMID:9582318
• PLOD3 è un membro glicosilato e legante metalli (ferro e manganese) delle famiglie delle diossigenasi e glicosiltransferasi, e le sue mutazioni sono associate a patologie.
• Idrossila e glicosila anche il dominio simile al collagene di MBL1, ampliando la sua specificità per il substrato. Riferimenti correlati: PMID:25419660

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 25-306 di PLOD3 umano, e copre una regione probabilmente accessibile al legame dell'anticorpo. Per Western blot, si consiglia l'uso di condizioni riducenti per rilevare la banda da 85 kDa, e la validazione con lisati di linee cellulari umane e murine note per esprimere PLOD3 (es. cuore, placenta).
• L'anticorpo è validato per ELISA; per applicazioni in ELISA sandwich, l'abbinamento con un altro clone che riconosce un epitopo distinto può migliorare la sensibilità. La reattività crociata con il topo suggerisce l'utilizzo negli studi su modelli roditori, ma la reattività crociata con altre specie deve essere verificata sperimentalmente.
• Poiché PLOD3 è una proteina residente nel RE e secreta, la preparazione del campione per la WB può trarre vantaggio da strategie di frazionamento subcellulare o arricchimento, in particolare per campioni con bassa espressione endogena.

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