Anticorpo policlonale di coniglio anti-PML+RARA per IF/ICC ed ELISA - P29590 / P10276

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di PML+RARA

• La proteina PML (proteina della leucemia promielocitica, TRIM19) è il componente strutturale dei corpi nucleari PML, svolge la funzione di ligasi E3 SUMO di tipo RING e partecipa alla soppressione tumorale, alla regolazione trascrizionale, all'apoptosi, alla senescenza e alla difesa antivirale. Riferimenti correlati: PMID:11500381, PMID:11575918, PMID:18391071, PMID:20972456, PMID:28250117
• Nella leucemia promielocitica acuta (APL), la traslocazione cromosomica t(15;17) crea la oncoproteina di fusione PML-RARA, compromettendo la normale formazione dei corpi nucleari PML e la segnalazione dell'acido retinoico.
• PML mostra una potente attività antivirale contro un'ampia gamma di virus a DNA e RNA, spesso sequestrando i componenti virali all'interno dei corpi nucleari PML; le isoforme PML-4 e PML-6 mostrano un'elevata attività di ligasi SUMO. Riferimenti correlati: PMID:20972456, PMID:28250117
• PML si localizza principalmente nel nucleo (nucleoplasma, corpi PML, nucleolo), ma esistono anche isoforme citoplasmatiche che possono associarsi al reticolo endoplasmatico e alle membrane degli endosomi precoci.
• La proteina è soggetta a importanti modifiche post-traduzionali, tra cui SUMOilazione, fosforilazione e acetilazione, che ne regolano la dinamica subcellulare e le interazioni.
• PML è considerata un soppressore tumorale e un proto-oncogene, a seconda del contesto dell'isoforma, ed è coinvolta nella risposta al danno del DNA, nella regolazione della telomerasi e nei ritmi circadiani.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende i residui 500-600 di PML e 1-100 di RARA, suggerendo una specificità verso la giunzione di fusione; può essere opportuno validare la reattività con PML o RARA wild-type individualmente.
• Per IF/ICC, si consiglia di utilizzare linee cellulari derivate da APL (ad es., NB4) che esprimono la fusione PML-RARA; un pattern nucleare microspeckled indica la compromissione dei normali corpi PML.
• Per l'ELISA, si raccomanda la titolazione dell'anticorpo contro PML-RARA ricombinante o antigeni peptidici per stabilire le concentrazioni di lavoro ottimali.
• È riportata una reattività crociata con campioni di ratto, ma si consiglia l'allineamento delle sequenze della regione immunogena di PML e RARA di ratto per confermare la conservazione dell'epitopo.

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